2015 Fiscal Year Annual Research Report
遺伝性顎口腔疾患特異的iPS細胞を用いた無血清培養系における発症機序解明
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26861723
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| Research Institution | Hiroshima University |
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Principal Investigator |
山崎 佐知子 広島大学, 大学病院, 病院助教 (00632001)
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2014-04-01 – 2016-03-31
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| Keywords | 歯学 / 細胞培養 / 再生医学 / 幹細胞 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
これまでヒトES細胞やiPS細胞は、フィーダー細胞上で血清添加培地を用いて培養されることが多く、不安定要素や異種抗原、未知の感染性因子の混入等の問題もあるため、細胞増殖・分化制御機構やその制御因子を比較検討することは非常に困難であった。このような培養条件下で培養されたヒト幹細胞では、増殖因子・分化誘導因子の機能を比較することが困難であり、臨床応用の面では安全性が問題であった。そこで、動物由来成分や代替血清などを含まず、全組成が明らかな無血清培地(hESF9)を基本培地として、フィーダー細胞および血清成分を使用せず、我々の開発した無血清培地(hESF9)を用いて、ヒトiPS細胞の未分化性と多分化能を維持可能な無血清培養系を確立した(Yamasaki S.et al. PLosOne 2014)。さらに、同培養系を用いて、ゲノムDNAへの遺伝子挿入がなく、ウイルスの確実除去が可能なセンダイウイルスベクター（SeVdp(KOSM)、SeVdp(KOSM)302L）を使用し、完全無血清培養系にてヒトiPS細胞の誘導が可能となった。また同ベクターは初期化4遺伝子が同一ベクター上に搭載されているため、誘導効率が安定しており、質の高いiPS細胞を高効率で誘導可能となった。そこで本培養系を用いて鎖骨頭蓋異形成症（CCD）由来iPS細胞を誘導し、樹立維持に成功した(Yamasaki S.et al. InVitroDevBiol 2015)。センダイウイルスを使用することで、ゲノムDNAへウイルス由来遺伝子挿入がなく、腫瘍化の原因と成り得ない安全なヒトiPS細胞の樹立が可能となり、さらに無血清培養系において動物由来蛋白を含まず、感染症等の恐れのない安全で高品質のヒトiPS細胞の供給が可能となったことで、難病の原因究明や治療法の開発を目指した疾患研究、医薬品の安全性試験などへの利用、細胞製剤の開発などの創薬研究、神経や血液・組織や臓器の機能修復や再生を目指した再生医療への応用を推進する上で有利となる。
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Research Products
(9 results)
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[Journal Article] Generation of cleidocranial dysplasia- specific human induced pluripotent stem cells in completely serum-, feeder-, and integration-free culture2015
Author(s)
S Yamasaki, A Hamada, E Akagi, H Nakatao, M Ohtaka, K Nishimura, M Nakanishi, S Toratani, T Okamoto
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Journal Title
In Vitro Cell.Dev.Biol.―Animal
Volume: -
Pages: -
DOI
Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research / Acknowledgement Compliant
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[Presentation] Generation and maintenance of integration-free human induced pluripotent stem (hiPS) cells from peripheral blood mononuclear cells in serum- and feeder-free growth factor defined medium2015
Author(s)
Hirotaka NAKATAO, Sachiko YAMASAKI, Eri AKAGI, Atsuko HAMADA, Manami OHTAKA, Ken NISHIMURA, Mahito NAKANISHI, Shigeaki TORATANI, Tetsuji OKAMOTO
Organizer
2015 in vitro biology biology meeting
Place of Presentation
Tucson, Arizona,USA
Year and Date
2015-06-03
Int'l Joint Research
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