2014 Fiscal Year Research-status Report
T細胞を基盤とした歯槽骨吸収および歯周ポケット形成の発症メカニズム解明
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26861820
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| Research Institution | Nagasaki University |
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Principal Investigator |
高森 明子(藏本明子) 長崎大学, 医歯薬学総合研究科(歯学系), 助教 (30631478)
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| Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2017-03-31
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| Keywords | attachment loss / T細胞 / 免疫複合体 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
１)LPSによる歯周炎誘発
ヌードラットにEscherichia coli LPSを腹腔内投与し、28日後にLPSを再度腹腔内投与して免疫系を活性化した感作ラットを作製した。また、T細胞機能を維持しているラットとしてF344ラットを使用して同様に免疫感作させた。次に、ヌードラット、F344ラットをそれぞれ、T細胞欠損、歯周炎誘発の組み合わせによりT細胞欠損+炎症誘導群（N+I群）、T細胞欠損群（N群）、T細胞維持+炎症誘導群（T+I群）、対照群（Cont群）の4群に分けた。LPSのbooster投与の1日後、イソフルラン麻酔下で上顎第1臼歯口蓋側歯肉溝にマイクロピペットを用いてLPS懸濁液を1日当たり30分間、滴下投与した。Cont群およびN群にはPBSを同様に滴下した。10日目の滴下の1時間後に各群のラットを屠殺した。上顎骨を摘出して4%パラホルムアルデヒドを含むリン酸緩衝液にて4℃で10時間固定した。10% EDTA-2Naにて4℃で3 週間脱灰したのちパラフィン包埋し、上顎第一臼歯の頬舌的な連続切片を作製した。
２）組織学的計測
各群の切片をHE染色し、attachment lossを計測した。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
今後サンプル数を増やし、組織学的計測及び免疫染色、TRAP染色を行う予定である。
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| Strategy for Future Research Activity |
歯周組織破壊の指標として、接合上皮内炎症性細胞数、上皮下結合組織中の炎症性細胞数、歯槽骨レベルを計測する。
また、免疫複合体検出のために、免疫複合体に最初に結合する補体成分であるC1の免疫組織化学的染色を行う。破骨細胞同定のためTRAP染色を行う。
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| Causes of Carryover |
サンプル数を揃えるための実験と免疫染色がずれ込んでいるため、次年度使用額が生じた。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
統計学的解析に必要なサンプル数を揃え、免疫染色を行うことで使用できる計画である。
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[Presentation] TLR2およびTLR4リガンド投与マウス歯肉における炎症性および抗炎症性サイトカインの発現2014
Author(s)
尾崎幸生, 吉村篤利, 金子高士, 鵜飼孝, 吉永泰周, Jorge Montenegro, Ziauddin SM, 白石千秋, 中村弘隆, 藏本明子, 原宜興
Organizer
日本歯科保存学会2014年度秋季学術大会
Place of Presentation
山形テルサ（山形県山形市）
Year and Date
2014-10-30 – 2014-10-31
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