2016 Fiscal Year Annual Research Report
Identification of the origin of breast cancer stem cells thorough live cell imaging of the mice for visualization of mammary stem cells
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26870729
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| Research Institution | Kansai Medical University |
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Principal Investigator |
厚海 奈穂 関西医科大学, 医学部, 助教 (90612151)
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| Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2017-03-31
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| Keywords | 乳腺幹細胞 / がん幹細胞 / 細胞系譜追跡 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究の目的の一つは、細胞の標識および追跡が可能な多色細胞系譜追跡法を用いて正常乳腺組織幹細胞を生体内で可視化することである。
そのためには、乳腺幹細胞を特異的に標識するマーカー分子が必要であるが、研究開始時点では不明であった。マーカーの探索を行うために、まずは、他の組織で幹細胞マーカーとしての報告がある遺伝子の下流に CreERT2 をノックインしたマウスと、多色細胞系譜追跡のために当研究室で開発されたレポーターマウスであるレインボーマウスとをそれぞれ掛け合わせて解析し、乳腺幹細胞を標識できるかを検討した。タモキシフェン投与により誘導された Cre による組換えの結果、蛍光タンパク質が発現する分子をスクリーニングしたのち、誘導後の長期間にわたってクローナルな増殖が見られる細胞のマーカー分子を探索・同定した。
並行して、新規の幹細胞マーカー分子を探索するために、ドライバーマウス作出系の立ち上げも行った。ノックインマウス作製のために必要な ES 細胞培養および組換え体の取得や一連の発生工学実験の結果、キメラマウスの取得および生殖系列への移行を確認した。同時に BAC Tg マウスの作出実験も実施した。
本研究の第二目的かつ最終目標は、同定した乳腺幹細胞ががんの起源であるがん幹細胞になるかどうかを調べることである。乳がん自然発症モデルマウス (トランスジェニックマウス) と、がん幹細胞マーカー候補遺伝子の下流に CreERT2 をノックインしたマウスおよびレインボーマウスの3系統のマウスを交配して、乳がん発症過程を通した解析を行い、候補となる遺伝子を見出した。しかしその後、大学動物実験施設の感染事故に伴い、半年以上、マウスを使用した実験が制限されたため、長期間の観察とマウスの交配の中止を余儀なくされた。沈静化後の再立ち上げとともにその成果を取りまとめ中である。
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Research Products
(2 results)
