2016 Fiscal Year Annual Research Report
Generation of transgenic monkey with tetracyclin-inducible gene expression system for neurodegenerative disease model.
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26870884
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| Research Institution | Shinshu University |
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Principal Investigator |
富岡 郁夫 信州大学, 学術研究院農学系, 助教 (30528196)
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| Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2017-03-31
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| Keywords | 神経変性疾患 / 疾患モデル / ポリグルタミン病 / マーモセット / トランスジェニック |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究の目的は、発現誘導可能な遺伝子システム（TET-onシステム）を用いて、ポリグルタミン病モデル霊長類（マーモセット）の家系を作出し、将来的に疾患バイオマーカーの開発につなげることである。
初年度に、異常伸長ポリグルタミン鎖をもつ変異遺伝子のデザインと発現ベクターの作製と変異遺伝子導入した遺伝子改変マーモセットの作出をおこなった結果、次年度にかけて、計7頭の産仔（TET1～TET7）の獲得に成功した。
次年度に、獲得したマーモセットの線維芽細胞を樹立しゲノム遺伝子解析を実施した結果、全ての個体に導入遺伝子が確認され、トランスジェニックマーモセットであった。また、TET-onシステムの動作確認のため、樹立した線維芽細胞をDox添加培地で培養し、その前後で遺伝子発現誘導解析をおこなった結果、3.8倍から5.7倍程度の遺伝子発現誘導が確認された。さらに、個体レベルでもTET-onシステムの動作を確認するため、トランスジェニックマーモセットにDox添加した飲み水を与え、Dox投与前後で血液を採取し遺伝子発現量解析に用いた。その結果、1.5倍から3倍程度の遺伝子発現誘導が確認された。
最終年度に、2頭のファウンダーマーモセット（TET1とTET4）から、顕微授精（ICSI）および自然交配により第二世代の獲得をおこなった。その結果、TET1からは1頭の、TET4からは4頭の産仔作出に成功した。遺伝子解析より、TET4の産仔4頭のうち1頭がトランスジェニックマーモセットであることが分かった。
以上より、TET-onシステムを導入したトランスジェニックマーモセットの家系を作出し、人為的な導入遺伝子の発現誘導に成功した。本モデルは発症を人為的にコントロールできるため、進行症状の詳細な解析や疾患バイオマーカー開発のための有力なツールとなり、様々な神経変性疾患の研究に貢献するものである。
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[Journal Article] Transgenic Monkey Model of the Polyglutamine Diseases Recapitulating Progressive Neurological Symptoms.2017
Author(s)
Tomioka I, Ishibashi H, Minakawa EN, Motohashi HH, Takayama O, Saito Y, Popiel HA, Puentes S, Owari K, Nakatani T, Nogami N, Yamamoto K, Noguchi S, Yonekawa T, Tanaka Y, Fujita N, Suzuki H, Kikuchi H, Aizawa S, Nagano S, Yamada D, Nishino I, Ichinohe N, Wada K, Kohsaka S, Nagai Y, Seki K
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Journal Title
eNeuro
Volume: ２８
Pages: 0250-16
DOI
Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
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