糖尿病誘発因子RBP4による骨破壊制御

2014 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 26893194
• Research Institution: Kyushu University
• Principal Investigator: 久本 由香里 九州大学, 歯学研究科(研究院), 助教 (40729026)
• Project Period (FY): 2014-08-29 – 2016-03-31
• Keywords: 破骨細胞 / 骨破壊 / RBP4

Outline of Annual Research Achievements

本年度は、主にマウス骨髄由来培養破骨細胞を用いて、破骨細胞におけるRBP4受容体STRA6の発現とRBP4曝露による破骨細胞分化への影響について検討を行った。
初めに、各日数培養した破骨細胞についてSTRA6のタンパク発現を検討した結果、どの培養日数においてもその発現は認められたが、培養日数の経過に伴いSTRA6の発現は増加した。
次に、破骨細胞にRANKLとともにRetinolまたはRBP4を100～500 nMの濃度で持続曝露し、培養3日目にTRAP染色を行った。その結果、RANKL単独刺激と比較して、RetinolまたはRBP4を同時に曝露することにより、ともに濃度依存的にTRAP陽性多核細胞数は著明に減少した。さらに、RANKL刺激24時間でタンパク質を回収し、破骨細胞分化に必須の転写因子の発現を検討した結果、Retinol同時曝露ではそれらの発現に大きな変化は認められなかったのに対し、RBP4を曝露した細胞ではNFATc1とc-Fosの発現に減少傾向が認められた。
以上の結果より、RBP4はその受容体STRA6を介したシグナルにより破骨細胞分化を抑制する可能性が示唆された。この結果は、RBP4が破骨細胞分化制御に関与する可能性を示した初めての知見である。しかしながら、RBP4による破骨細胞分化抑制の詳細なメカニズムおよびRetinolによる分化抑制との関連性ついてはまだ不明であるため今後の検討が必要である。また、骨吸収等の機能面への影響についても今後検討する必要がある。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

本年度計画していた培養破骨細胞へのSTRA6発現制御系を用いた実験に関して、マウス由来骨髄細胞への発現ベクターおよびsiRNA導入法の条件検討に予想以上の時間を費やしてしまい計画通り進めることができなかった。

Strategy for Future Research Activity

今後は本年度遂行していたin vitro実験を並行しながら、肥満モデルマウスや骨破壊モデル動物を用いたin vivo解析にも着手する。in vitro実験では主にRBP4-STRA6システムによる破骨細胞分化抑制メカニズムの解明を目指す。さらに、in vivo解析により各種病態におけるRBP4-STRA6システムの重要性と骨破壊制御の関連性を明らかにする。