幼少期の咀嚼が成長後の脳発達や行動に及ぼす影響について

2014 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 26893239
• Research Institution: Nara Medical University
• Principal Investigator: 松末 友美子 奈良県立医科大学, 医学部附属病院, 研究員 (60571007)
• Project Period (FY): 2014-08-29 – 2016-03-31
• Keywords: 咀嚼 / 軟食 / 硬食 / 神経新生

Outline of Annual Research Achievements

軟食摂取群として生後21 日に離乳し、4 週間軟食を与える群（SD7）、その後さらに7週間軟食を与える群（SD14）または硬食に切り替えて与える群（SHD14）を作製し各実験に供する。なおコントロール群として硬食摂取群（HD7、HD14）を用いる。
①内分泌試験として各実験群のマウス（HD7、SD7、HD14、SD14、SHD14）から採血を行い、血漿中のCORT の濃度をELISA（Enzyme-linked ImmunoSorbent Assay）法にて測定する。まずは生後7週齢を測定している。生後14週については、今後測定予定である。
②c-Fosタンパク質を指標とした脳機能異常部位の検索については正常c-Fosタンパク質の発現の基準を決定するために検索中である。今後軟食摂取群のc-Fosタンパク質の発現ついて、検索予定である。
③グリア細胞を指標にした脳領域における神経新生異常としては、指標とするグリア細胞のマーカーを検索中である。オリゴデンドロサイト分化段階で、特異的なマーカーが考えられるが、オリゴデンドロサイト前駆細胞、成熟オリゴデンドロサイトとして、neuron glial antigen(NG)2、carbonicanhydrase（CAII）、olig2などのマーカーを検索中である。

Current Status of Research Progress

4: Progress in research has been delayed.

Reason

軟食摂取モデルマウス、硬食摂取モデルマウスの作製に時間を要し、本実験開始までに時間がかかっている。ELISA法施行に必要な血液採取は断頭時採取しているが、測定必要な十分量が採取できていないため、内分泌試験でのELISA法の実験が遅れている。また、c-Fosタンパク質を指標とした脳機能異常部位の検索については、正常c-Fosタンパク質の発現の基準を決定することが必要と思われ、そちらを優先し予備実験中のため、予定していた実験の開始が遅れている。グリア細胞を指標にした脳領域における神経新生異常としては、指標とするグリア細胞のマーカーを検索中である。使用を予定していたマーカーの発売企業の同抗体の販売中止が決定したため、異なる動物種の抗体を検索中であり、実験が遅れている。

Strategy for Future Research Activity

まずは軟食摂取モデルマウス、硬食摂取モデルマウスの作製を確実に行い、各実験に供する。
各マウスは3週齢から4週間軟食を摂取する群（SD7）、硬食を摂取する群（HD7）を作製。、最初の4 週間軟食を摂取し、その後7 週間硬食に切り替える群（SHD14）を作製する。また、14週齢まで硬食のみ（HD14）、軟食のみ（SD14）を新たに作製する。内分泌試験でのELISA法に必要な十分量の採血を行うため、心臓からの採血とする予定である。c-Fosタンパク質を指標とした脳機能異常部位の検索については、正常c-Fosタンパク質の発現の基準を決定し、各脳領域でのc-Fos発現の観察を行う予定である。グリア細胞を指標にした脳領域における神経新生異常としては、指標とするグリア細胞のマーカーを検索し、各脳領域のマーカーの発現を免疫組織化学で検索し、観察は共焦点レーザー顕微鏡にて行う予定である。