T細胞分化因子による抗腫瘍免疫調節機構及び遺伝子の解析

1986 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 61015059
• Research Institution: Osaka University
• Principal Investigator: 岡田 全司 阪大, 医学部, 助手 (40160684)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 川瀬 一郎 大阪大学, 医学部, 助手 (10161324) ; 桝野 富弥 大阪大学, 医学部, 助手 (20135677) ; 小倉 剛 徳島大学, 医学部, 教授 (00028490)
• Keywords: ヒト / キラーT細胞分化因子 / ヒトT細胞ハイブリドーマ / 遺伝子クローニング / リンホカイン / T細胞の分化 / LAK活性 / 抗腫瘍免疫 / 生体内効果

Research Abstract

1.ヒトT細胞分化因子1(KHF-1)の産生をコードする遺伝子の解析:ヒトT細胞ハイブリドーマ24A・CA2より産生されるKHF-1(キラーT細胞誘導、IL-2及びIL-2R誘導能を持ちM・W2万)の産生をコードする遺伝子の解析をまずNorthern hybridization法を用いて行なった。その結果、ヒトIL-1α,β,ヒトIL-4,BSF-2と異なる遺伝子によりKHF-1はコードされることが示された。つぎに24ACA2細胞からpoly【(A)^+】-RNAを抽出し、Okayama-Berg法によりcDNAライブラリーを10万個作製した。またdifferential hybridization法によりKHF-1産生ヒトTハイブリドーマに特異的なcDNAを1万個得た。これらのcDNAをベクターに組み込みCos1細胞に発現させ、KHF-1cDNAを含むと考えられる遺伝子群45,18を得た。これらの群についてさらにgene cloningを行ないつつある。
2.KHFによるT細胞活性化機構の解析:(a)in vitraでの解析;ヒト・キラーT細胞の誘導にはKHF-1による初期分化(24時間以内)が必要でその後にIL2が作用することを明らかにした。また、ヒト・キラーT前駆細胞ハイブリッド・クローン55A52・2・70に直接作用し分化を誘導した。さらに、ヒトTハイブリドーマ55Aより産生されるT細胞分化因子2(KHF-2)と相乗的に作用してヒト末梢T細胞及びキラーT前駆細胞クローンにおける分化を誘導した。このことよりキラーT細胞の誘導には少くとも三種のリンホカイン(KHF-1,IL-2,KHF-2)が必要であることが示された。(b)in vivoでの解析;KHF-1をC57β1/6αΡ815のアロ腫瘍の系に腹腔内投与し、8日目の脾細胞中のキラー活性を検討した結果、キラーT細胞誘導効果を示した。また同系腫瘍Lewis肺癌担癌マウスの脾細胞におけるLAK活性誘導効果が強く認められた。これらの結果よりKHFは新しい免疫療法の開発に重要であると思われる。

Research Products

• [Publications] Okada,M: J.Immunol.136. 1288-1294 (1986)
• [Publications] Masuno,T: Cancer Research. 46. 4195-4199 (1986)
• [Publications] Masuno,T: Cancer.Immunol.Immunother.22. 132-138 (1986)
• [Publications] Kawase,I: Cancer Research. 46. 1047-1054 (1986)
• [Publications] Hayashi,S.: Infection and Immunity. 52. 128-133 (1986)
• [Publications] Komuta,K: Jpn.J.Cancer.Res.78. 185-192 (1987)
• [Publications] 岡田全司,松橋直 監修: "免疫の新しい考え方Q&A" 協和企画通信, 465 (1986)