1989 Fiscal Year Annual Research Report
園芸作物におけるバイオテクノロジ-利用に関する基礎的研究
Project/Area Number |
61440010
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Research Institution | Hokkaido University |
Principal Investigator |
八鍬 利郎 北海道大学, 農学部, 教授 (70001394)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
鈴木 卓 北海道大学, 農学部, 助手 (30196836)
荒木 肇 北海道大学, 農学部, 助手 (30183148)
原田 隆 北海道大学, 農学部, 助教授 (30001457)
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Keywords | プロトプラスト培養 / 不定胚形成 / 胚培養 / 凍優保存 / 生殖質 / 細胞培養 / 細胞選抜 / 茎頂培養 |
Research Abstract |
1.不定胚の形成:ニンニクの茎盤部と花床部を2、4ーDやNAAの添加されたMS培地で培養することでEmbryogenicカルスが形成された。カルスの内部には各種のステ-ジの不定胚が形成されていた。茎盤部由来のEmbryogenicカルスは、1μMNAAと10μMBAが添加されたMS培地に移植することで、花床部由来のEmbryogenicカルスは1〜5μMNAAと5μMBAの添加されたMS培地に移植することで再生個体が形成された。ヤマノイモにおいても、ヤマトイモの茎頂を4.5μM2、4ーDが添加されたMS培地で、ウチワドコロの未熟胚を10〜20μM2、4ーDが添加されたMS培地で培養することによりEmbryogenicカルスが形成された。2.胚培養による雑種植物体の育成:ヤマノイモの未熟な胚は、種子の状態で30日ほど培養して胚的生長を促し、その後に胚を摘出して培養することで交雑実生を獲得することができた。これらの培養により、ナガイモ×ナガイモ、ジネンジョ×ナガイモ、ヤマトイモ×ナガイモ等の交雑実生が得られ、それらの特性も調査することができた。3.生殖質・遺伝子源の凍結保存:ブドウ体内のデンプンの糖への転化は9月以降に起こり、遊離型ABAは8月〜11月に増加し12月以降減少した。電子顕微鏡を用いた観察によれば、夏型細胞内の大きな液胞は冬になると分裂して小胞化した。夏型細胞は細胞内凍結を起こしやすいが、冬型細胞は細胞外凍結を起こし膜系の障害も減少して凍結に耐えるようになることがわかった。4.大量増殖法の確立:ギョウジャニンニクの茎盤部を含む茎頂をMS培地にBA10^<-4>M.2、4ーD10^<-7>M.ショ糖20g/l及び寒天7g/lを添加した培養茎(pH5.7)で培養し、92%の個体に多芽体の形成をみた。さらに多芽体を分割移植することにより増殖が可能となった。生長調節物質無添加区では58%の発根率であった。このほか、Tridiazuronを用いることによってリンゴ茎頂からの植物体再生率の向上についても成果を得た。
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[Publications] 鈴木卓: "園芸植物の栄養繁殖に関する研究(第7報)無菌培養によるブル-ベリ-のシュ-トの増殖と発根" 北海道大学農学部邦文紀要. 16. 221-229 (1988)
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[Publications] 荒木肇: "毒素抵抗性細胞の選抜ーアスパラガス茎枯病毒素抵抗性カルスの選抜ー" 組織培養. 14. 7-11 (1988)
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[Publications] Tatsuhiro Ezawa: "Studies on freeze-preservation of fruit tree germplasm -III Freeze-Preservation of grane snoot tips-" Jaurnal of the Faculty of Agiculture Hokkaido University. 64. 51-55 (1989)
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[Publications] 溝延学: "培養系を利用したアスパラガス茎枯病抵抗性株の育成に関する研究(第1報)毒素抵抗性カルスの選抜と選抜カルスの特性" 北海道大学農学部邦文紀要. 16. 245-251 (1989)
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[Publications] 鈴木卓: "果樹における生殖質の凍結保存に関する研究(第2報)リンゴ茎頂を凍結し融解した場合の生存に及ぼす凍結温度並びに材料採取時期及び低温(0°C)保存の影響" 北海道大学農学部邦文紀要. 16. 295-300 (1989)
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[Publications] Gaku Mizonobe: "Studies on Tissue CaHure in Asparagus Officimalis L" Journal of the Faculty of Agriculture.64. 176-182 (1990)
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[Publications] 八鍬利郎: "植物組織培養の世界(監修樋口春三)XII植物茎頂の凍結保存の項" 柴田ハリオ硝子株式会社, 299-310 (1988)