老年痴呆-アルツハイマー病の分子生物学的,神経化学的,免疫組織化学的研究

1986 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 61440049
• Research Institution: Tokyo Institute of Psychiatry
• Principal Investigator: 石井 毅 精神医研, その他, 研究員 (80090405)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 徳武 哲 財団法人東京都精神医学総合研究所, 研究部分子生物学, 研究員 (50090402) ; 篠田 友孝 東京都立大学, 理学部化学教室, 助教授 (50000253) ; 小柳 新策 財団法人東京都精神医学総合研究所, 研究部超徴形態, 参事研究員 (50018595)
• Keywords: アルツハイマー病 / アミロイド / 補体 / モノクローナル抗体 / ED-Cu / ミエリン塩基蛋白 / ヒストン

Research Abstract

1.アルツハイマー・アミロイドおよびクロイツフエルト・ヤコブ病脳のアミロイド(クル斑)に補体Ciq,【C_3】,【C_4】の存在することを免疫組織化学的に証明した。この所見は上記アミロイド沈着に免疫機構の関与を示唆するものと思われる。
2.アルツハイマー・アミロイドに対するモノクローナル抗体の作成に成功した。このモノクローナル抗体の抗原は原発性アミロイドーシスのアミロイド組織よりプラス5(1968)の方法により得た"粗アミロイド蛋白"である。この抗体はELISAでは粗アミロイド蛋白と反応するが、免疫組組化学では原発性アミロイドーシスの脾のアミロイドと反応しない。この抗体はアルツハイマー・アミロイドと原発性アミロイドーシスのそれとの間に共通抗原の存在を示唆し興味深い。
今年度はこの抗体に反応する蛋白の同定を行なった。この蛋白は分子量約800〜1000KD、等電点約6.8であり、二次元目にSDJを加えた条件では分子量30KDのサブユニットを持つと推定された。
3.アルツハイマー・アミロイドの可溶化とアミノ酸組成の同定。
アルツハイマー・アミロイドは難溶で、化学分析,分離精製が困難であった。われわれは絹蛋白(β-蛋白)を特異的に溶解するED-Cu(エチレンヂアミン水酸化第二銅でアルツハイマー・アミロイドの可溶化に成功し、さらに透析により再合成にも成功した。この蛋白のアミノ酸組成を調べたところ、ミエリン塩基蛋白およびある種のヒストン分画のそれに類似することを見出した。現在、この二つの蛋白に対する抗体を用いて免疫組織化学を行なうとともに、アミノ酸配列の同定を急いでいる。

Research Products

• [Publications] 石井毅: 生体の科学. 37. 496-499 (1986)
• [Publications] Ishii T;Haga S:Yagishita S;Tateishi J: Neuropathology,Supplement 3. Suppl 3. 49-57 (1986)
• [Publications] Tokutake S;Ishii T: Neuropathology,Supplement 3. Suppl 3. 79-86 (1986)
• [Publications] Ishii T;Sato M;Haga S;Shinoda T;Katho K;Saito T: Neuropathol & Appl Neutobiol. 12. 441-445 (1986)
• [Publications] 石井毅: 脳と神経. 39. 17-29 (1987)
• [Publications] Kametani F;Sato M;Shinoda T;Ishii T: Brain Research.
• [Publications] 石井毅,小阪憲司,石井毅 編 他著: "老化性痴呆と抗痴呆薬" 日本科学技術協会, 550 (1987)