1988 Fiscal Year Annual Research Report

中性糖脂質合成酵素の活性部位の構造解析

Research Project

Project/Area Number	61570116
Research Institution	Osaka University
Principal Investigator	谷口直之大阪大学, 医学部, 教授 (90002188)
Keywords	ジアルデヒド / 親和標識 / αーガラクトシルトランスフェラーゼ / 大サブユニット
Research Abstract	ラット肝から分離精製したグロボトリアオシルセラミド合成酵素(αーGal転移酵素)を中心に研究した. (1)^3H-UDP-dialdehydeを合成し, α-Gal転移酵素を標識し, 酵素の大小2つのサブユニットのどちらかに標識されるかを検索した. また, 100%不活化時における化学量論的な結合量をみた. (2)^3H-UPP-dialで標識した酵素をTPCK-トリプシンで消化し, 標識ペプチドを高速液体クロマトグラフィーおよびペーパークロマト, 高圧電気泳動で分画した. (3)標識ペプチドのアミノ酸組成および一次構造を, シークエンサーで解析し, アミノペプチダーゼM, カルボキシペプチダーゼA, エンドリジルペプチダーゼなどで処理し, 標識アミノ酸を同定した.