非A非B型肝炎に特異的に発現する遺伝子の同定とその性状について

1986 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 61570147
• Research Institution: Nihon University
• Principal Investigator: 江角 真理子 日大, 医学部, 講師 (30167291)
• Keywords: 非A非B型肝炎 / 遺伝子クローニング

Research Abstract

1.非A非B型肝炎に特異的に発現する遺伝子をみつけるために、以下に示す2つの方法でクローニングを行った。同一チンパンジーで、非A非B型肝炎ウィルス感染前、感染後の肝臓を得ることができなかったので、異なるチンパンジーから2種類の材料を得てmRNAを抽出した。
(1)非A非B型肝炎ウィルス感染材料からのcDNAライブラリーの作製mRNAからcDNAを作成し、λファージにくみこみcDNAライブラリーを作成した。正常肝mRNAC感染肝mRNAから【^(32)P】標識のcDNAを各々作製し、現在cDNAライブラリーをスクリーニングしている。
(2)非A非B型肝炎特異的なcDNAの分離とクローニング
感染肝mRNAよりcDNAを作製し、正常肝mRNAとハイブリッドを形成するcDNAを除き、感染肝mRNAとのみハイブリダイズするcDNAを分離した。これを用いてクローニングを試みている。
2.感染肝細胞初代培養によって、非A非B型肝炎ウィルス遺伝子が同定できるか否かを検討した。
モデル実験系としてアヒル肝細胞初代培養を行い、アヒルB型肝炎ウィルス遺伝子の合成が検出できるか否かを検討した。【^3H】標識チミジンを用いると細胞内,細胞外共にウィルスDNAが確認できた。この方法を用いて、非A非B型肝炎ウィルス遺伝子を【^3H】標識チミジン或いは【^3H】漂識ウリジンで検出できる可能性がでてきた。現在、検出感度について検討し【^(32)P】漂識化合物の利用も考えている。

Research Products

• [Publications] 内田俊和,鈴木高祐,有井雅幸,江角真理子,清水文夫,志方俊夫: 日本肝臓学会総会講演要旨. 22. 53 (1986)
• [Publications] 有井雅幸,江角真理子,内田俊和,志方俊夫: 日本ウィルス学会総会演説抄録. 34. 145 (1986)