ヒト培養正常メラサイトの増殖・分化形質発現癌化機構に及ぼすTPAの影響

1988 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 61570495
• Research Institution: Sapporo Medical College
• Principal Investigator: 堀越 貴志 札幌医科大学, 医学部, 講師 (40145587)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 小野寺 英夫 札幌医科大学, 医学部, 助手 (10194614)
• Keywords: 培養 / ヒト正常色素細胞 / TPA / Cキナーゼ / Hー7 / OAG / チロシナーゼ / コレラトキシン

Research Abstract

(1)Cキナーゼの阻害剤、H7の色素細胞の増殖抑制及びチロシナーゼ活性への影響:H7は(20μM、50μMで)、色素細胞の^3HTolRの取り込みを、それぞれ65%、85%抑制した。これらH7の抑制効果は、choleratoxinにより約50%回復した。色素細胞の形態に変化を認めなかった。H7は、チロシナーゼ活性には、有意な抑制効果を示さなかった。
(2)OAG(Oleoyl-2-acetyl-glycerol)の影響:20μg/ml OAGの添加86時間後、ほとんどの色素細胞が死滅した。このOAGの作用は、20μMのH7の添加により阻止された(堀越他Skin Concer 1989印刷中)。Cキナーゼの活性化(OAG添加)が、色素細胞の増殖を抑制することが示唆された。しかしTPAの効果が、直ちにCキナーゼの作用によると結論付けることにも問題があり、今後も検討を要する。
(3)リン酸化蛋白の同定:TPA除去、あるいはOAG添加により28Kdの蛋白に、リン酸化の減弱を認めた。色素細胞が経時的にTPAにより刺激されているので、TPAによるリン酸化蛋白の異同を検索することは、困難であった。この点を解決するには、bーFGF cholera toxinの存在下で色素細胞を維持し、この状態でTPAのリン酸化蛋白の同定を試みるよう改善が必要と考えられた。
(4)色素細胞内のCキナーゼの定量:アッセイに必要な細胞数を用意することは現在不可能であり、Cキナーゼの活性化を測定する新しい方法の確立が待たれる。

Research Products

• [Publications] T.HORIKOSHI: Structure and function of melanin. 3. 95-102 (1986)
• [Publications] K.HASHIMOTO: Br J Dermatol. 115. 205-209 (1986)
• [Publications] H.TAKAHASHI: Am J Dermatopathol. 9. 189-197 (1987)
• [Publications] H.TAKAHASHI: J Dermatol. 14. 533-541 (1987)
• [Publications] 堀越貴志: Skin Cancer. (1989)
• [Publications] T.HORIKOSHI: J Invest Dermatol.