1987 Fiscal Year Annual Research Report
Project/Area Number |
61580221
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Research Institution | Nagoya University |
Principal Investigator |
岩村 達一 名古屋大学, 農学部, 教授 (00013300)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
武田 穣 名古屋大学, 農学部, 助手 (70155026)
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Keywords | クロレラ / 遺伝子 / クローニング / オンコジーン / μ-myc / RuBisCo遺伝子 / ヒストン遺伝子 |
Research Abstract |
(1)クロレラのν-mycオンコジーン様DNA断片 ニワトリν-mycオンコジーンを用い, クロレラDNAライブラリーから探索したクロレラDNA断片(DCAB-DNA)は, そのままではクローン化せず, 大きく二部分(DCA断片とB断片)に分けて初めてクローン化に成功した. 全体で4833bpの2のDNA断片の二つのストランド(DBとBD)のうち, DBの塩基配列の方が, より一般的(高等生物的)なmycオンコジーン類似の, 三エクソン〜二イントロン構造を仮定し易い. 次いで, クロレラ細胞よりmRNAを抽出, クローン化DNAとホモロガスなmRNAを探索した. 得られたポリA+mRNA中に, 全DCAB-DNAとハイブリダイズするものは検出困難であったが, クローン化の時と同様DCA断片とB断片に切断した場合, これらとハイブリダイズするポリA+mRNAが検出できた. 従ってこのmRNAはDCA-とB-断片の互いに隣接する部位近辺にホモロジーを持ち, 又DCAB-DNA自体はポリAシグナルはないことから見て, DCAB-DNAはクロレラmyc様DNAの一部であり, まだポリAシグナルその他を含む部位がこの4833bpの外の領域に存在する可能性が考えられる. 更に, クロレラの同調培養法によるセルサイクルの3時間毎の各段階についてこのポリA+mRNA量を調べた結果, T6とT9(初期, 前中期)に最大であった. 今後更に構造を検討する. (2)クロレラDNA中に, RuBisCo大サブユニット遺伝子, ヒストン遺伝子を検出した. 今後これらをクローン化する. (3)レーザー式マイクロイジェクターを利用して先に低分子色素の投入には成功し, テトラサイクリン耐性遺伝子を含むプラスミドDNAをクロレラ細胞に導入する実験を試みたが, 現在迄の所ポジティブな結果を得ていない. 今後他プラスミドを試みる.
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Research Products
(5 results)
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[Publications] Iwamura, T.: Proc. Symp. on Biological Sciences in Space(held in Nagoya in Nov. 1986);Myu Research, Tokyo. 257-264 (1987)
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[Publications] Fukumoto, T;T. Nishimura, & T. Iwamura: Analytical Biochemistry;Academic Press, Inc., Inc., N. Y.(1988)
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[Publications] Nishimura, T.;R. R. Pachpande, & T. Iwamura: Cell Struct. Funct.(1988)
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[Publications] Miwa, N.;Y. Takabe, & S. Kuwatsuka: J. Bacterriol.(1988)
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[Publications] Takeda, Y.;T. Nishimura, & T. Iwamura: In preparation.