1990 Fiscal Year Annual Research Report

ギャップ結合細胞間連絡のモノクロ-ナル抗体法による生理学的意義の解明

Research Project

Project/Area Number	62440022
Research Institution	Hiroshima University
Principal Investigator	菅野義信広島大学, 歯学部, 教授 (00034158)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	広野力広島大学, 歯学部, 助手 (10199135) 柴芳樹広島大学, 歯学部, 助教授 (90110452)
Keywords	ギャップ結合 / 細胞間連絡 / モノクロ-ナル抗体 / ラット肝臓 / ラット唾液腺 / 培養細胞 / 細胞増殖 / 分泌
Research Abstract	ギャップ結合細胞間連絡は分子量1000以下の生理活性物質の自由な細胞間移動による接触細胞間の情報交換を意味し,細胞分化増殖や分泌の調節に重要な役割を果たしている。本研究では,膜中のチャネルであるギャップ結合蛋白質の分離,精製とその抗体作製から,それを応用して細胞間連絡の多様な生理機能を明らかにすることが主要な目的である。ラット肝臓より分離精製した分子量27Kのギャップ結合蛋白質に対するモノクロ-ナル抗体を作製し,以下の研究成果を挙げた。 1.)ラット肝臓27Kギャップ結合蛋白質に対する四種のモノクロ-ナル抗体産生細胞株を樹立した。得たモノクロ-ナル抗体はすべてIgGタイプで,肝凍結切片でギャップ結合を免疫組織化学的に染色した。 2.)抗体価の高いモノクロ-ナル抗体の認識部位を検索した所,酵素消化による27Kギャップ結合蛋白質の分解産物のいずれのものにも結合しなかった。モノクロ-ナル抗体は,27K蛋白質の高次構造を認識している可能性が高い。 3.)マウス受精卵,初期胚及び顎下腺腺房細胞内に抗体と蛍光色素を注入した所,蛍光色素の細胞間移動は影響されなかった。抗体のギャップ結合から機能抑制に至る過程は,反応時間が必要なものと考えられ,抗体注入細胞の標識方法から注入技術等の改善を試みている。 4.)マウス顎下腺腺房細胞は,肝臓27Kギャップ結合蛋白質に対するモノクロ-ナル抗体で組織染色され,かつ細胞膜分画内にもモノクロ-ナル抗体を反応する27K蛋白質の存在がイムノブロット法で示された事より肝臓ギャップ結合蛋白質と同種の蛋白質で唾液腺腺房細胞間ギャップ結合が構成されていると考えられる。以上モノクロ-ナル抗体を用いて各種細胞でのギャップ結合構成蛋白質とその機能について検索した。

Research Products

(7 results)

All Other

All Publications (7 results)

[Publications] 菅野義信: "唾液腺腺房細胞のギャップ結合の役割を考える" 日本唾液腺学会誌. 31. 11-23 (1990)
[Publications] Shiba,Yoshiki: "Inhibition of gapーjunctional intercellular communication and enhanced binding of fibronectinーcoated latex beads by stimulation of DNA synthesis in quiescent 3T3ーLl cells" Jounal of Cellular Physiology. 145. 268-273 (1990)
[Publications] Kanno,Yoshinobu: "The regulation and maintenance of the gap junctional intercellular communication in submandibular glands of rat" First APOCB Congress abstracts:94. (1990)
[Publications] Hirono,Chikara: "Monoclonal Antibodies against gap junction protein from rat liver" The Japanese Journal of Physiology. 40. 15-15 (1990)
[Publications] 佐々木康人: "分泌刺激後のラットの顎下腺ギャップ結合機能の長時的追跡" 日本生理誌. 52. 117-117 (1990)
[Publications] Kanno,Yoshinobu: "Reduction of intercellular communication in submandibular gland acinar cells through calcium influx and protein kinase C by acetylcholine and adrenaline" Elsevier Science Publishers, 99-102 (1990)
[Publications] 菅野義信: "電気的結合:新生理学大系,第7巻発生・分化の生理学" 医学書院, 180-188 (1991)

1990 Fiscal Year Annual Research Report

ギャップ結合細胞間連絡のモノクロ-ナル抗体法による生理学的意義の解明

Principal Investigator

菅野 義信 広島大学, 歯学部, 教授 (00034158)

Research Products

[Publications] 菅野 義信: "唾液腺腺房細胞のギャップ結合の役割を考える" 日本唾液腺学会誌. 31. 11-23 (1990)

[Publications] Shiba,Yoshiki: "Inhibition of gapーjunctional intercellular communication and enhanced binding of fibronectinーcoated latex beads by stimulation of DNA synthesis in quiescent 3T3ーLl cells" Jounal of Cellular Physiology. 145. 268-273 (1990)

[Publications] Kanno,Yoshinobu: "The regulation and maintenance of the gap junctional intercellular communication in submandibular glands of rat" First APOCB Congress abstracts:94. (1990)

[Publications] Hirono,Chikara: "Monoclonal Antibodies against gap junction protein from rat liver" The Japanese Journal of Physiology. 40. 15-15 (1990)

[Publications] 佐々木 康人: "分泌刺激後のラットの顎下腺ギャップ結合機能の長時的追跡" 日本生理誌. 52. 117-117 (1990)

[Publications] Kanno,Yoshinobu: "Reduction of intercellular communication in submandibular gland acinar cells through calcium influx and protein kinase C by acetylcholine and adrenaline" Elsevier Science Publishers, 99-102 (1990)

[Publications] 菅野 義信: "電気的結合:新生理学大系,第7巻発生・分化の生理学" 医学書院, 180-188 (1991)

菅野義信広島大学, 歯学部, 教授 (00034158)

[Publications] 菅野義信: "唾液腺腺房細胞のギャップ結合の役割を考える" 日本唾液腺学会誌. 31. 11-23 (1990)

[Publications] 佐々木康人: "分泌刺激後のラットの顎下腺ギャップ結合機能の長時的追跡" 日本生理誌. 52. 117-117 (1990)

[Publications] 菅野義信: "電気的結合:新生理学大系,第7巻発生・分化の生理学" 医学書院, 180-188 (1991)