1989 Fiscal Year Annual Research Report
肝細胞がん発生過程における肝細胞表面抗原のモノクロ-ナル抗体を用いた解析
Project/Area Number |
62480199
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Research Institution | Keio University |
Principal Investigator |
森實 敏夫 慶應義塾大学, 医学部・内科, 講師 (20129703)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
岩渕 直人 慶應義塾大学, 医学部・内科, 助手 (90168592)
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Keywords | モノクロ-ナル抗体 / HCCM / 1ーbutanol extract / tumor-sepecific antigen / 肝細胞癌 |
Research Abstract |
我々は、ひと肝癌細胞株HCCーMを樹立し、HCCーMを抗原としてモノクロ-ナル抗体1Hー9を作製した。1Hー9McAbのimmunoglobulin classはIgMであることが判明した。1Hー9McAbはHCC-M butanol extractとdose dependentに反応することがELISAによってわかり、大腸癌細胞株COLOー205、正常肝butanol extractとはほとんど反応しなかった。また、酵素抗体間接法によって1Hー9 McAbを用いた酵素抗体間接法の結果、その染色性は、HCCーMでは細胞膜、細胞質および一部細胞の核、特に核周囲と思われる部分に認められた。Chang肝細胞では、主に細胞質が顆粒状に染色された。一方、Hela、MKN-28、COLOー205はまったく染色されなかった。また、各種細胞培養上清を種々の濃度に希釈してcompetitiveELISAで検討したところ、HCCーM培養上清中に1Hー9McAbの対応抗原が存在することが示唆された。 1Hー9McAbの対応抗原の性状を調べるために、HCC-M butanol extractはformalin処理では、その抗原性はわずかに低下したのみで保たれていたがtrypsin処理ではまったく消失した。また、1Hー9はheat labileなことより、ある種の蛋白であると考えられた。高速液体クロマトグラフィ-によると、HCC-M butanol extractの小分子量の成分に肝細胞癌のtumor specific antigen(TSA)が存在することが示された。一方、micro-tube-LAIassayを行なったところ、小分子量分画では分子量15000前後のbandが主成分であり、それが腫瘍特異抗原である可能性が示唆された。
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Research Products
(5 results)
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[Publications] 佐藤逸郎: "ヒト肝癌細胞培養HCCーMに対するモノクロ-ナル抗体1Hー9の反応性" 消化器と免疫. 17. 215-219 (1986)
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[Publications] 松村茂: "肝細胞癌患者血清中に検出された肝癌細胞 抽出物(1ーbutanol extract)に対する抗体の研究" 慶應医学. 67. 1-13 (1990)
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[Publications] 佐藤逸郎: "Serological Diagnosis of Hepatocellular Carcinoma with monoclonal antibody" Proceedings of the lst International Symposium on Viral Hepatitis and Hepatocellular Carcinoma. 139-153 (1986)
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[Publications] Watanabe,T.: "Establishment of a cell line(HCC-M)from a human hepatocellular carcinoma." Int.J.Cancer. 32. 141-146 (1983)
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[Publications] 佐藤逸郎: "Ieukocyte adherene inhibition(LAI)反応からみた肝癌腫瘍特異抗原" 消化器と免疫. 18. 236-240 (1987)