1989 Fiscal Year Annual Research Report
線虫の神経系変異種を用いた神経系の形態形成に関する分子遺伝学的研究
Project/Area Number |
62480462
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Research Institution | Toyohashi University of Technology |
Principal Investigator |
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Keywords | C.エレガンス / 抗チュ-ブリンモノクロ-ナル抗体 / cDNA / α-チュ-ブリン / β-チュ-ブリン / 免疫組織化学 |
Research Abstract |
チュ-ブリン遺伝子を同定するために、C.エレガンスのcDNAライブラリ-をαおよびβチュ-ブリンに特異的なモノクロ-ナル抗体を用いてスクリ-ニングを行った。モノクロ-ナル抗体3A5(Dr.M.Fuller)は特異的にC.エレガンスのαチュ-ブリンを認識し、免疫組織化学的手法によりC.エレガンスの神経細胞体やそれらの軸索分化過程を特異的に染色する。また、3A5は有糸分裂している微小管をも染色する。我々はモノクロ-ナル抗体3A5を用い、λgtll(Dr.R.Barsted)をベクタ-としたC.エレガンスのcDNAライブラリ-をスクリ-ニングし、その中から14個のクロ-ンを同定した。その後、クロ-ンを精製、再確認しプラスミドベクタ-pUC118にサブクロ-ニングを行った。そして、これらのクロ-ンのデレ-ションミュ-タントをssDNAに調整しSanger,Coulsonのジィデオキン法によりシ-クエンスを行い、遺伝解析をした。チュ-ブリンをコ-ドしているSQ#TbA77クロ-ンの一つはニワトリのαチュ-ブリン遺伝子と79%の相同性があり、アミノ酸配列では88%の相同性を持つことが解った。 同様に、C.エレガンスのcDNAライブラリ-をβチュ-ブリンに対するモノクロ-ナル抗体E6B6(Dr.T.Arai)を用いてスクリ-ニングした。その結果15個のクロ-ンが得られ、それらをプラスミドベクタ-pUC118にサブクロ-ニングを行った。現在、これらの遺伝子の解析を行っている。
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[Publications] Shahid S.Siddiqui: "Anti-tubulin monoclonal antibodies that bind to specific neurons in Caenorhabditis elegans." Journal of Neuroscience. 9(8). 2963-2973 (1989)
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[Publications] Shahid S.Siddiqui: "Too few foreign scientists in Japan" Nature. 340. 337-338 (1989)
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[Publications] Shahid S.Siddiqui: "Axonal outgrowth and process placement of Sensory Lumbar Neurons in the nematode Caenorhabditis elegans." In:“Neurobiology of Sensory Systems"Eds.R.Singh and N.J.Strausfeld,Plenum,New York. 1. 241-265 (1989)
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[Publications] Shahid S.Siddiqui: "Molecular correlates of neural network mediating touch sensitivity in Caenorhabditis elegans" Neural Networks. 1. 275-275 (1988)
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[Publications] Shahid S.Siddiqui: "Mutations affecting growth and guidance of mechanosensory Neurons in the nematode C.elegans." Society of Neuroscience,USA,Anuual Meeting,Toronto,Abst. 14. 596-596 (1988)
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[Publications] Shahid S.Siddiqui: "Neural Circuitry mediating locomotion in C.elegans:Molecular correlates of Inhibitory Motor Neurons" Proceedings of Intl.Joint Conf.Neural Networks,San Diego,California,USA. (1990)
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[Publications] Shahid S.Siddiqui: "Intl.Neural Networks Conf.reports.Paris,France" Aspects of mechanosensory circuitry in C.elegans, (1990)
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[Publications] Shahid S.Siddiqui: "Neuroscice Research" Mutations affecting axonal growth and guidance of motor neurons and mechanosensory neurons in C.elegans, (1990)