1989 Fiscal Year Annual Research Report
耳下腺アミラ-ゼ分泌機構(protein kinaseの係わり、adenylatc cyclase調節因子)
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62570844
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| Research Institution | The Nippon Dental University |
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Principal Investigator |
下村 浩巳 日本歯科大学, 新潟歯学部, 助教授 (40139259)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
寺田 あかね 日本歯科大学, 新潟歯学部, 助手 (60180080)
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| Keywords | β_1-アドレナリン受容体 / ラット / 遺伝子 / 構造 / cDNA / Lambdc charon35 |
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| Research Abstract |
ラットβ_1-アドレナリン受容体遺伝子をクロ-ニングし、その構造を明らかにした。1)probe DNA:CCAGCGGCCCCACACCACAATGGTGGCCCCGAAAGG(ヒト遺伝子塩基番号337-372に相当)GGCCTCGCGGAACACCCGGAGGTACACGAAGGCCAT(712-747に相当)を化学合成し、5'側に^<32>Pでラベルした。2)cDNA(ラット心臓)libraryのスクリ-ニング:cDNA(Clontech,USA)libraryから合成probeを用いスクリ-ニングを行い、hybridizeするプラ-クを吊り精製後3種をpUC118にクロ-ニングした。各々TRB-1,2,3と命名した。3)ラット遺伝子DNA libraryの調製とスクリ-ニング:ラット遺伝子DNAのEco RI fragmentsをLambda charon 35のEco RI vectorと連結し、パッケ-ジングしてtiter 10^6のlibraryを得た。cDNAと同様にしてスクリ-ニングし、1種のhybridizeするプラ-クを得、pUC118にサブクロ-ニングしてRGB-1と命名した。4)マッピング:得られたクロ-ンのマッピングを行い、また必要に応じてサブクロ-ニングを行なった。(RGB-1のmapを下に示す)5)塩基配列解析:cDNAおよびgenomic DNAの塩基配列解析の結果ラットβ_1-アドレナリン遺伝子はイントロンを有しない事が判明し、またその塩基数は1,392(464amino acid)(ヒト:1,434 base,478amino acid)であった。ヒトβ_1-アドレナリン受容体遺伝子とは90.0%の相同性を有した。
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[Publications] H.Shimomura,A.Terada,K.Sanada: "Phosphorylations of Paroetid and Sabmandbular gland protein by calaium 1 phospholipid dependent protein kinase" Jpn.J.Oral Biol.31. 618-621 (1989)
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[Publications] H.Shimomura,A.Terada: "Cloning of rat β_1-adrenergic receptar DNA" International Asso.Dental Res.(抄録)J.Dent.Res.69. 240 (1990)
