リソソーム酵素および糖脂質分解活性化因子の糖鎖と細胞内転送機構に関する研究

1987 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 62580123
• Research Institution: Kobe University
• Principal Investigator: 山下 克子 神戸大学, 医学部, 助教授 (70030905)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 小出 典男 岡山大学, 医学部, 講師 (20142333)
• Keywords: 細胞内輸送シグナル / リソソーム局在性糖蛋白質 / 糖脂質分解活性化因子 / 糖鎖の極微量分析

Research Abstract

マンノ -スー6-リン酸以外のリソソームへの認識機構を探る為, 今年度はヒト正常肝及びGMI-ガングリオシドーシス患者肝由来のGMI-Activatorを精製し, その糖鎖構造を解析した. 両者共, 部分分解を受けているか否かの差はあるものの, アスパラギン残基に結合した1から4本鎖の複合型糖鎖で従来のリソソームへの輸送シグナルと異なることが明らかとなった. なかでも, 還元末端の〓アセチルグルコサミンにフコースが結合しているのが大きな特長である. 一般にヒト肝産生の血清糖蛋白質にこのフコースが欠けていることから, このフコース残基を含めた複合型糖鎖が細胞内の特定器官への輸送機構と関わりをもっていることが示唆され, 本研究を完成するための基盤が出来上った.
2.これらの構造研究に際し, サンプルが百mg前後しか得られないことから各種レクチンカラムを組合わせた極微量分析法の開発も合わせて行ない, 今年度はDatuna stramorium agglutininの厳密な糖結合特異性を決定した. このレクチンは複合型糖鎖の3および4本鎖の結合位置の同定を可能とし, 400メッシュ以下のBio-Gel P-4カラム法との組合わせで本研究を遂行することが出来た.
3.糖蛋白質が細胞内の特定のオルガネラに局在する為の輸送機構に糖鎖が関与することが一般的な現象である可能性を探るため, 各種臓器の上皮細胞のapical sideに局在するジペプチジルペプチダーゼIV, アミノペプチダーゼ, γ-グルタミルトランスペプチダーゼの糖鎖を比較研究した. その結果, 三者共, 極めて類似した特異な糖鎖構造を有することを明らかにすることが出来た.

Research Products

• [Publications] A. Hitoi: Journal of Biochemistry(Tokyo). 100. 29-41 (1987)
• [Publications] K. Yamashita: Journal of Biological Chenistry. 262. 1602-1607 (1987)
• [Publications] K. Yamashita: Cancer Research. 47. 3451-3459 (1987)
• [Publications] K. Yamashita: Biochemistry.