脊椎動物のβ-ガラクトシド結合性レクチンの構造・機能・役割

1987 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 62580133
• Research Institution: Teikyo University
• Principal Investigator: 笠井 献一 帝京大学, 薬学部, 教授 (40001052)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 平林 淳 帝京大学, 薬学部, 助手 (40156691) ; 小田 裕子 帝京大学, 薬学部, 助手 (30129986) ; 大山 雄二 帝京大学, 薬学部, 助手 (90129982)
• Keywords: レクチン / β-ガラクトシド / ニワトリ胚 / ヒト胎盤 / アミノ酸配列 / cDNA / 形態形成 / ガン化

Research Abstract

1.ヒト胎盤レクチン, ニワトリ16Kレクチンの一次構造決定. 核酸レベルでの解析を目指し, それぞれに対するmRNA画分を調製し, CDNA合成後, λgt11に挿入してライブラリーを作製した. 抗体によるスクリーニングで多数のポジティブクローンを得たので, 現在確認作業中であり, 順次配列を決定する予定である. またアミノ酸レベルでの解析も平行して行っており, 特にヒト胎盤レクチンについては, 各種特異的切断法による断片を分離しており, 自動エドマン法を適用して配列決定中である. ニワトリ14Kレクチンとの類似性はかなり高い.
2.分子レベルでのレクチンの機能解明. 諸性質の研究にアフィニティークロアトグラフィーの利用がきわめて有効なことがわかっているので, 更に高度化すべく, 高性能アフィニティークロマトグラフィー用吸着体を各種作製し検討した. 特にニワトリ14Kレクチンに対するモノクローン抗体を固定化した吸着体を用いると, 糖結合特異性を含めた諸性質の分析が可能になるなど, 有益な知見がえられた.
3.生物学的役割. ニワトリ14Kレクチンについて, 発生途上の皮膚における役割を調べるために, 抗体標識し電子顕微鏡で観察した. 表皮細胞においては, デスモソーム周辺に明らかに分布しており, 細胞間相互作用に関与していることが強く示唆された. ヒトにおけるレクチンの役割を解明する目的で, 各種組織, 特にガン組織について, ラジオイムノアッセイ, ウエスタンブロッティング等の手法により分析し, 肝臓, 肺臓等においては, ガン化によりレクチン含量が増加すること, またこれに対するレセプターの性状も変化することが示唆された.

Research Products

• [Publications] J.Hirabayashi: J.Biochem.101. 987-995 (1987)
• [Publications] J.Hirabayashi: Biochim.Biophys.Acta. 916. 321-327 (1987)
• [Publications] K.Kasai: Proceeding of 9th international lectin meeting.IN PRESS.
• [Publications] H.Hirano: Proceeding of Kagashima conference on glycoconjugate.IN PRESS.
• [Publications] Y.Ohyama: In preparation.
• [Publications] 笠井 献一: 細胞工学. 6. 222-232 (1987)