1988 Fiscal Year Annual Research Report

ダニ汚染の免疫化学的検出システムの開発

Research Project

Project/Area Number	62860011
Research Institution	Hiroshima University
Principal Investigator	岡智広島大学, 工学部, 教授 (80034320)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	和田武志フマキラー, 開発本部, 開発企画部長小川謙吾フマキラー, 開発本部, 本部長城智彦県立広島病院, 院長重田征子広島大学, 工学部, 助手 (10034381) 小埜和久広島大学, 工学部, 助手 (10144883)
Keywords	アレルゲン / ダニアレルゲン / ダニ喘息 / ヒスタミン遊離 / mRNA / cDNA / ファージ / 遺伝子工学
Research Abstract	1.主要ダニアレルゲンの分離 (1)ダニ排泄物中の主要アレルゲンの一つとして、MW7,400の糖タンパクを単離した。この成分は、従来の報告と比較して糖含量(70%)及び分子量が著しく高い。しかも、動物実験ではアナフラキシー非誘発性で、減感作治療剤として有望である。 (2)また、同じダニ排泄物から、5,000<MW<10,000の糖質を含んど含まないタンパクを、もう一つの主要ダニアレルゲンとして単離した。このアレルゲンは、従来のダニアレルゲンのいずれよりも著しく低分子量で、しかも通常の試験室的検出法であるELISA法では検出できない。 (3)さらに、ダニ虫体からも、MW15,000の弱酸性ダニアレルゲンを単離した。この成分は、従来のダニアレルゲンとほぼ同一の分子量を示すが、等電点が明らかに低い。今回分離した3つの主要アレルゲンは、ダニ汚染検出システムの開発だけでなく、ダニ喘息の減感作治療法の開発に大きく寄与するものと期待される(広島大学グループ)。 2.ヒスタミン遊離測定によるアレルギー評価昨年度に開発したヒスタミン遊離のHPLC測定法による、ダニ喘息患者のアレルゲン感受性及び遮断抗体価の同時測定値から、喘息患者のダニアレルギーを定量的、且つ客観的に評価する方法を確立した。この成果は、ダニ喘息診断の精度だけでなく、ダニアレルゲンの分離・精製の効率を大きく向上するものと期待される(県立広島病院グループ)。 3. ダニアレルゲンの遺伝子工学的生産ダニ虫体中mRNAのcDNAを組み込んだ組替ファージ(λgtII)の1.6×10^5ケから、41ケのダニアレルゲンcDNA組替体を分離した。現在、このcDNAを発現用ベクターに組み込んで微生物に導入し、各種ダニ抗原の大量生産の可能性を追及中である(広島大学及びフマキラーグループ)。