1989 Fiscal Year Annual Research Report
Project/Area Number |
63470021
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Research Institution | Tohoku University |
Principal Investigator |
小倉 協三 東北大学, 非水溶液化学研究所, 教授 (80006303)
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Keywords | ゲラニルゲラニオ-ル / 水酸化酵素 / プレニルトランスフェラ-ゼ / イソプレノイド / 生合成 / プラウノト-ル / ゲラニルゲラニル二リン酸 |
Research Abstract |
前年度に引きつづき、ゲラニルゲラニル二リン酸をプラウノト-ルへ変換する酵素活性を指標にして、ゲラニルゲラニル基の水酸化酵素の追跡を行った。Croton sublyratusの芽生えの粗酵素とトリチウム標識のゲラニルゲラニオ-ルをトリトン×100の存在下にインキュベ-トすると、TLC上でプラウノト-ルと同じ挙動をする物質の生成が認められることから、水酸化酵素の直接の前駆体は遊離のアルコ-ル体と考えられた。しかし、酵素活性が微弱であるため、植物の生育条件の検討の必要が生じた。アブシジン酸やジクロロフェノオキシトリエチルアミンなどの薬品処理を行なった結果、ゲラニルゲラニル二リン酸合成酵素の活性の上昇を認めたが、水酸化酵素の活性の上昇は認められなかった。また、葉緑体にはイソペンテニル二リン酸をゲラニルゲラニオ-ルに変換する酵素系が存在することがわかった。ゲラニルゲラニオ-ルの水酸化が、他の植物で知られるアルカロイドの水酸化酵素のように、2-ケトグルタル酸依存型の酵素によるものであるかどうかを調べた結果、その可能性はほぼ否定された。酵素活性の増大する条件を探索する実験と並行して、高比放射能標識のゲラニルゲラニル二リン酸およびゲラニルゲラニオ-ルを合成するための酵素的手法を研究した。その結果、高度好塩菌Halobacterium halobiumから得られるゲラニルゲラニル二リン酸合成酵素がその目的に合うことがわかった。また、ラット肝臓にもゲラニルゲラニル二リン酸合成能があることを見いだした。酵素反応生成物の高感度同定の方法を検討し、ピロリン酸エステルのままの質量分析が可能であることを確かめた。
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Research Products
(3 results)
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[Publications] 小倉協三: "Artificially elicited capabilities of enzymes and their Application in natural product chemistry" Pure and Applied Chemistry. 61. 477-480 (1989)
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[Publications] 佐上博: "The Biosynthesis of dehydrodolicyl phosphates by rat liver microsomes" Biochimica et Biophysica Acta. 1002. 218-224 (1989)
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[Publications] 吉田一郎: "Protection of hexaprenyl diphosphate synthase of Micrococcus luteus B-P 26 against inactivation by sulfhydryl reagents and arginine-specific reagents" Biochimica et Biophysica Acta. 995. 138-143 (1989)