1989 Fiscal Year Annual Research Report
植物起源プロテア-ゼインヒビタ-をモデルとした新規インヒビタ-の設計合成
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63470023
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| Research Institution | Kyushu University |
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Principal Investigator |
脇 道典 九州大学, 理学部, 助手 (30037212)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
青柳 東彦 九州大学, 理学部, 助教授 (80037267)
大野 素徳 九州大学, 理学部, 教授 (30038434)
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| Keywords | プロテア-ゼインヒビタ- / 植物起源インヒビタ- / キモトリプシン阻害ペプチド / トリプシン阻害ペプチド / ペプチド合成 |
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| Research Abstract |
プロテア-ゼインヒビタ-は生体内プロテア-ゼの制御因子として極めて重要である。そのなか植物起源Bowman-Birkインヒビタ-(BBI)はトリプシン(Tsin)およびキモトリプシン(Csin)を同時に阻害する。そこで、BBIの各阻害部位を含む最小活性発現ユニットに着目し、その阻害部位を酵素親和性を保持、分解不能なジペプチドisostereに置換したペプチドを設計、合成し、その阻害能検討より、より強力で新規なプロテア-ゼ阻害ペプチドの探索、開発を目的とする。1.BBI Tsin阻害部位変換Csin阻害ペプチド:BBIのTsin阻害部位(Lys-Ser)をCsinに特異性の高いTyr-Serとしたノナペプチド(1__〜)を母体とし、そのscissileペプチド結合をスタチン型ジペプチドisostereに置換したノナペプチドアナロ-グ(2__〜)を合成目的物とした。(1)ジペプチドisoslere(3__〜):key化合物となる(3S、4S)および(3R、4S)の3__〜の調製は、昨年度見い出した有効ル-トによった。(2)ノナペプチド合成:1__〜および3__〜を導入した(3S、4S)と(3R、4S)の2__〜の調製は、液相法によった。(3)合成ペプチドのCsin阻害活性:阻害能を検討の結果、一方のジアステレオマ-3__〜を含む(3S、4S)ー2__〜のみがCsinを弱いながら阻害した。これは阻害能発現に立体構造的因子の重要性を示す。さらに母体1__〜は既知BBI関連ペプチドのうち最強の阻害能(Ki〜10^<-7>M)を示した。2.立体制約性アミノ酸含有Csin阻害ペプチドの設計、合成:立体制約性デヒドロおよびメタノアミノ酸を含む一連のジペプチドを合成、Csin阻害能、コンホメ-ション解析を行った。これら結果にもとづき、同様の構造をとりうる一連の単純ジペプチドについても検討の結果、その阻害コンホメ-ションを特徴づけることが出来た。例えば、HーDーLeu Phe-OB_2lのKi〜10^<-5>M。これは酵素阻害剤の設計にコンホメ-ションの考察が有効なことを示す。プロテア-ゼ阻害能検討の酵素反応に於て、pHメ-タ-と純水製造装置前処理器としてピュアラインは有用であった。
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Research Products
(6 results)
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[Publications] Tomohisa OGAWA: "Enzyme inhibition by dipeptides containing 2,3-methanophenylalanine,a sterically constrained amino acid" FEBS Lett.250. 227-230 (1989)
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[Publications] Yasuyuki SHIMOHIGASHI: "Specific inhibitory conformation of dipeptides for chymotrypsin" Biochem.Biophys.Res.Commun.(1990)
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[Publications] Tomohisa OGAWA: "Enzyme-inhibitory conformation of dipeptides containing sterically constrained amino and 2,3-methanophenylalanine" Peptide Res.(1990)
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[Publications] Hiroshi SAKAMOTO: "H-D-Leu-Phe-OB_2l inhibits chymotrypsin with specific conformation similar to that of H-D-Phe-Leu-OMe" FEBS Lett.(1990)
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[Publications] Yasuyuki SHIMOHIGASHI: "Design and synthesis of dipeptide inhibitors directed to chymotrypsin catalytic center with specific inhibitory conformation" J.Mol.Recogn.(1990)
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[Publications] Makoto SHIOTA: "Functional conversion of an anti-trypsin domain peptide of Bowman-Birk inhibitor into an anti-chymotripsin peptide" FEBS Lett.(1990)
