1989 Fiscal Year Annual Research Report
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63480014
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| Research Institution | KYOTO UNIVERSITY |
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Principal Investigator |
浅田 浩二 京都大学, 食糧科学研究所, 教授 (50027182)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
遠藤 剛 京都大学, 食糧科学研究所, 助手 (90201962)
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| Keywords | 活性酸素 / ス-パ-オキシド / ス-パ-オキシドジスムタ-ゼ / アスコルビン酸ペルオキシダ-ゼ / モノデヒドロアスコルビン酸還元酵素 |
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| Research Abstract |
1.アスコルビン酸ペルオキシダ-ゼの精製と分子的性質
アスコルビン酸ペルオキシダ-ゼをチャ新葉から精製し、この酵素には2種類のアイソザイムがあること、従来知られているペルオキシダ-ゼと異なり糖鎖をもたないこと、アミノ酸配列が異なることを明らかにした。これらのことからAPXが過酸化水素消去に機能する新しいタイプのペルオキシダ-ゼであることが明らかになった。またhydorxyureaおよびp-aminophenolがこの酵素によって酸化され生成するラジカルがこの酵素を失活させること、すなわちこれらがこの酵素の自殺基質であることを見出し、これらの基質を利用してAPXを特異的に検出する方法を確立した。
2.ス-パ-オキシドジスムタ-ゼの精製と分子的性質
イネ植物体から4種のCuZn-SODと2種のMn-SODアイソザイムを見出した。このうち、CuZn-SODの1分子種は、単量体で活性をもつ、これまでに例のないものであった。またCuZn-SODのうち、主に葉で発現されるアイソザイム(CuZn-SOD I)と非光合成組織で発現されるもの(CuZn-SOD II,III,IV)とは免疫学的に異なっていた。
シダおよび緑藻からそれぞれ3種のCuZn-SODを見出し、その一部を精製または部分精製した。これらの酵素は、被子植物、ほ乳類の酵素と類似した分子的性質をもつことが明らかになった。3種のアイソザイムは免疫学的にクロロプラスト型とサイトソル型に分けられた。このことはクロロプラスト型とサイトソル型の分子進化上の分岐点がきわめて早い時期であったことを示唆する。
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[Publications] Kanematsu,S.: "CuZn-Superoxide dismutases in rice:Occurrence of an active,monomeric enzyme and two isozymes in leaf and non-photosynthetic tissues." Plant and Cell Physiology. 30. 381-391 (1989)
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[Publications] Kanematsu,S.: "CuZn-Superoxide dismutases from the fern Equisetum arvense and the green alga Spirogyra sp.:Occurrence of chloroplast and cytosol types of enzyme." Plant and Cell Physiology. 30. 717-727 (1989)
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[Publications] Chen,G-X: "Ascorbate peroxidase in tea leaves:Occurrence two isozymes and their differences in enzymatic and molecular properties." Plant and Cell Physiology. 30. 987-998 (1989)
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[Publications] Kanematsu,S.: "Characteristic amino acid sequences of chloroplast and cytosol isozymes of CuZn-superoxide dismutase in spinach,rice and horsetail." Plant and Cell Physiology. 31. 99-112 (1990)
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[Publications] Chen,G-X: "Hydroxyurea and aminophenol are the suicide inhibitors of ascorbate peroxidase." Journal of Biological Chemistry. 265. 2775-2781 (1990)
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[Publications] Asada,K.: "Ascrobate peroxidase as a scavenger of hydrogen peroxide in plants.In:Medial,Bioligical and Chemical Aspects of Free Radicals.Edited by Hayashi,O.,Niki,E.,Kondo,M.and Yosikawa,T." Elsevier, 766 (1989)
