1990 Fiscal Year Annual Research Report
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63480039
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| Research Institution | Tohoku University |
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Principal Investigator |
羽柴 輝良 東北大学, 農学部, 助教授 (20189476)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
高橋 英樹 東北大学, 農学部, 助手 (20197164)
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| Keywords | 病原糸状菌の線状プラスミド / R__ー.<solani>___ー菌の転移因子 / 染色体DNAとpRS64との相同性 |
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| Research Abstract |
(1)R__ー.<solani>___ー菌の転移因子、pRS64のほぼ全領域のシ-ケンシングを行い、これらの塩基配列に対して、ORF解析の結果、0.4Kb前後の短いORFが4つ認められた。さらに、本転移因子を保持するRIー64菌株から抽出したmRNAに対して、pRS64の各断片をプロ-ブとしてノ-ザン・ブロット解析の結果、pRS64由来と思われる0.6Kbのバンドが検出された。本バンドは、pRS64上に認められたORFー2の領域のプロ-ズ、BEー3と反応したことから、本ORFは何らかのタンパク質をコ-ドしていることを認めた。デ-タ・バンクのホモロジ-・サ-チでは、これらの機能を明らかにする事が出来なかったので、現在、インビトロトランスレ-ション、二次元電気泳動法等で同定を進めている。
(2)PFGE法によって分離した染色体DNAは約1.1〜3.5Mbの大きさで、R__ー.<solani>___ー菌から5本認められた。バンドの大きさより推定されるゲノムサイズは約10Mbであり、本菌では染色体数、ゲノムサイズが初めて決定された。染色体DNAとpRS64との相同性の解析の結果、PFGE法によって分離した染色体のもっとも小さいサイズ、約1.1Mbとハイブリダイズした。しかも、相同性を認めた1.1Mb染色体DNAの制限酵素断片とpRS64とのハイブリダイゼ-ションから、相同領域は分散していると考えられた。次に、相同領域を持つ染色体DNA断片のクロ-ニングと相同性の検定を行い、pRS64と相同性を示すクロ-ン、300個を得た。現在、本クロ-ンの性状解析を行っている。
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Research Products
(3 results)
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[Publications] Miyasaka,A.: "Detection and properties of plasmidーlike DNA in isolates from nine anastomosis and interspecific groups of <Rhizoctonia>___ー <Solani>___ー" J.Gen.Microbiology. 136. 1791-1798 (1990)
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[Publications] Hashiba,T.: "Nucleotide sequence of the linear plasmid pRS64 and properties of plasmid DNA (plDNA) in isolates of 9 anastomosis groups of <Rhizoctonia>___ー <Solani>___ー" The US __ー Japan Seminar on molecular strategies of pathogens and host plants. (1990)
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[Publications] Hashiba,T.: "Handbook of Applied Mycology Vol.4." Arora,D.K., (1991)
