1989 Fiscal Year Annual Research Report
新しい制癌剤感受性試験ニックトランスレ-ション法の確立とその応用
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63480291
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| Research Institution | Kyushu University |
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Principal Investigator |
前原 喜彦 九州大学, 医学部, 助手 (80165662)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
鴻江 俊治 九州大学, 医学部, 助手 (30215199)
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| Keywords | in situニックトランスレ-ション法 / DNA傷害 / 制癌剤感受性 |
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| Research Abstract |
制癌剤による癌細胞への影響として、形態学的、病理学的変化がおこる以前に癌細胞DNA傷害を早期の段階で定量化することができれば制癌剤の殺細胞作用を即座に予知し、個々の癌患者に対しより良い治療法を検索することが可能となる。そこで遺伝子工学の分野で確立された手法として広く用いられているニックトランスレ-ション法を用いて、制癌剤による癌細胞DNA傷害をin situの条件下で可視下検出し、定量化をおこない、制癌剤感受性の判定手段として確立した。即ち、制癌剤による培養癌細胞DNA傷害部位を大腸菌DNA Polymerase Iを用いて^3Hラベル3リン酸ヌクレオチドで人工的に修復、次に乳剤を感光させて、黒化度として顕微鏡下にDNA傷害の程度を定量化する方法である。この方法により数十分という短時間の薬剤処理で、また少数の細胞で判定が可能となった。in vitro条件下、マウス白血病由来P388細胞とアドリアマイシン耐性株P388/ADRのあいだで、アドリアマイシンによるDNA傷害の程度に差を認め、アドリアマイシンに対する感受性とDNA傷害の密接な関係が明らかとなった。
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[Publications] Yoshihiko Maehara: "Nick translation detection in situ of cellular DNA strand break induced by radiation" American Journal of Surgery. 134. 7-10 (1989)
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[Publications] Yoshihiko Maehara: "Adriamycin-induced DNA strand breaks in HeLa and P388 leukemia cells detected by in situ nick translation" Journal of Pathology. 159. 323-329 (1989)
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[Publications] Yoshihiko Maehara: "Detection of DNA strand breaks in HeLa cells in vitro and mouse sarcoma-180 cells in vivo induced by an alkylating agent,carboquone,using in situ nick translation" Oncology. (1990)
