新しい制癌剤感受性試験:ニックトランスレ-ション法の確立とその応用

1990 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 63480291
• Research Institution: Kyushu University
• Principal Investigator: 前原 善彦 九州大学, 医学部, 助手 (80165662)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 鴻江 俊治 九州大学, 医学部, 助手 (30215199)
• Keywords: in situ ニックトランスレ-ション法 / DNA傷害 / 制癌剤感受性

Research Abstract

制癌剤による癌細胞への影響として、形態学的、病理学的変化がおこる以前に癌細胞DNA傷害を早期の段階で定量化することができれば制癌剤の殺細胞作用を即座に予知し、固々の癌患者に対しより良い治療法を検索することが可能となる。そこで遺伝子工学の分野で確立された手法として広く用いられているニックトランスレ-ション法を用いて、制癌剤による癌細胞DNA傷害をin situの条件下で可視化検出し、定量化をおこない、制癌剤感受性の判定手段として確立した。
即ち、制癌剤による培養癌細胞DNA傷害部位を大腸菌DNA polymerase Iを用いて、 ^3Hラベル3りん酸ヌクレオチドで人工的に修復、次に乳剤を感光させて、黒化度として顕微鏡下にDNA傷害の程度を定量化する方法である。
この方法により数十分という短時間の薬剤処理で、また少数の細胞で判定が可能となった。in vitro条件下、マウス白血病由来p388細胞とアドリアマイシン耐性株p388/ADRのあいだで、アドリアマイシンによるDNA傷害の程度に差を認め、アドリアマイシンに対する感受性とDNA傷害の密接な関係が明らかとなった。さらにこの方法を用いることで、温熱および放射線によるDNA傷害も定量化することができた。
ニックトランスレ-ション法は制癌剤感受性の判定に有用な手段となりうると考えられる。

Research Products

• [Publications] Yoshihiko Maehara: "Detaction of DNA strand breaks in HeLa cells in vitro and mouse sarcomaー180 cells in vivo induced by an alkylating agent,carboquone,using in situ nick translation" Oncology. 47. 282-286 (1990)
• [Publications] 鴻江 俊治: "In situ ニックトランスレ-ション法を用いた温熱および抗癌剤によるDNA傷害の細胞レベルの検出" Cytoprotection & biology. 8. 161-167 (1991)