外科的血栓塞栓症の病因と病態の解析、とくに凝固制御機構の新しい分析法の確立と応用

1988 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 63480293
• Research Institution: Jichi Medical University
• Principal Investigator: 松田 道生 自治医科大学, 医学部, 教授 (50048980)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 諏合 輝子 自治医科大学, 医学部, 助手 (60183844) ; 諸井 将明 自治医科大学, 医学部, 助教授 (00049074) ; 坂田 洋一 自治医科大学, 医学部・講師, 助教授に昇任 (40129028) ; 吉田 信彦 自治医科大学, 医学部, 講師 (10049083) ; 村山 英樹 自治医科大学, 医学部, 講師 (70146166)
• Keywords: 異常フィブリノゲン / プロテインC / 血栓塞栓症 / 遺伝子解析 / アンチトロンビンIII / トロンビン-アンチトロンビンIII複合体 / 血管内皮細胞 / 血液凝固制御機構

Research Abstract

1.異常フィブリノゲンの構造と機能の分析:本研究初年度、6家系で新しい3型を含むアミノ酸置換を同定した。また従来分析して来た異常分子でも新しい置換型を同定した。中でも、γ鎖275位アルギニン→システイン置換は4家系で同定された。置換システインにさらに遊離システインがジスルフィド結合していること、またγ鎖310位メチオニン→スレオニン置換例では新たに糖付加の構造が形成されたことからγ鎖308位アスパラギンにオリゴ糖の付加が証明された。これらはフィブリンの重合に関与する領域での2重の構造異常であり、著明なフィブリン重合障害が認められている。後者では架橋形成も悪く、事実、著しい外傷後出血と創傷治癒遅延が特徴的であった。2年度に分析を進めたい。
2.プロテインC異常症の解析:1才時から重篤な血栓塞栓症(脳血栓、DVT、肺塞栓)に罹患している18才女性でプロテイン(PC)の欠損(父から)と分子異常(母から)が見出された。異常分子ならびに遺伝子解析から、活性化に際してトロンビンにより開裂される重鎖12位のアルギニンがトリプトファンに置換(CGG→TGG)しており、活性化されない異常分子と判明した。構造と機能異常が明示された世界最初の症例である。
3.培養血管内皮細胞(VE)を用いた血栓形成機構の分析:ヘパリンとの結合能を欠く異常アンチトロンビンIII(ATIII)はVEとも結合し難く、VE上で進行する血栓形成機序を制御し得なかった。この事は生理的な血栓制御機序の分析に有用な情報と考えられる。
4.トロンビン・ATIII複合体形成機序の解析:当該複合体に対して作成したモノクローナル抗体を応用し、ATIIIによるトロンビンの中和反応を分析した結果、反応初期に不安定なアシル複合体中間体が形成されることが認められた。この中間体は従来仮設として提唱されていた。
以上1〜4の成績を研究発表欄に記載の如く報告又は報告予定である。

Research Products

• [Publications] Asakura,Shinji,: Biochimica et Biophysica Acta. 952. 37-47 (1988)
• [Publications] Uratani,Yoshihiko,: Thrombosis Research. 49. 591-600 (1988)
• [Publications] Sakata,Yoichi,: The Journal of Biological Chemistry. 263. 1960-1969 (1988)
• [Publications] Kubota,Koyomi,: Cell Structure and Function. 13. 123-128 (1988)
• [Publications] Takeuchi,Yumiko,: Thrombosis Research,. 51. 117-126 (1988)
• [Publications] Terukina,Shigeharu,: The Journal of Biological Chemistry. 263. 13579-13587 (1988)
• [Publications] Yoshida,Nobuhiko,: The Journal of Biological Chemistry. 163. 13848-13856 (1988)
• [Publications] Yoshida,Nobuhiko,: Blood. 71. 480-487 (1988)
• [Publications] Matsuda,Michio,: New England Journal of Medicine. 319. 1265-1268 (1988)
• [Publications] 松田道生: 日本胸部疾患学会雑誌. 26. 473-477 (1988)
• [Publications] 吉田信彦: 日本血液学会雑誌. 51. 1288-1293 (1988)
• [Publications] 諏合輝子: 日本血液学会雑誌. 51. 1297-1298 (1988)
• [Publications] Yamazumi,Kensuke,: Thrmbosis and Haemostasis. 60. 476-480 (1988)
• [Publications] Yamazumi,Kensuke,: The Journal of Clinical Investigation.
• [Publications] Asakura,Shinji: Acta Haematologica Japonica.
• [Publications] Asakura,Shinji,: The Journal of Biological Chemistry.
• [Publications] Sugo,Teruko,: European Journal of Biochemistry.
• [Publications] Sugo,Teruko: THE Journal of Biological Chemistry.
• [Publications] Sakata,Yoichi,: Blood.