1989 Fiscal Year Annual Research Report
モノクロ-ナル抗体を用いた歯周病細菌の簡易迅速同定法の開発
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63480459
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| Research Institution | National Institute of Health |
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Principal Investigator |
古賀 敏比古 国立予防衛生研究所, 歯科衛生部, 部長 (10037541)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
西原 達次 国立予防衛生研究所, 歯科衛生部, 研究員 (80192251)
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| Keywords | モノクロ-ナル抗体 / 歯周病細菌 / ラテックス凝集試験 / 血清型 |
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| Research Abstract |
歯周病細菌の1つであるActinobacillus actinomycetemcomitansのa型とc型の血清型多糖抗原の化学構造を決定した。すなわち、A.actinomycetemcomitans ATCC 29523株(a型)と9710株(c型)の全菌体からオ-トクレ-ブ法により粗抗原を抽出した。同標品について、イオン交換クロマトグラフィ-とゲル濾過で精製を行った。精製抗原の化学構造をメチル化、ガスクロマトグラフィ-・質量分析法、^<13>C-NMR、^1H-NMR法などによって解析した。その結果、a型多糖抗原は-3)-6-deoxy-α-L-Talp-(1-2)-6-deoxy-α-L-Talp-(1-、c型多糖抗原は-3)-6-deoxy-α-L-Talp-(1-2)-6-deoxy-α-L-Talp-(1-の繰り返し構造をもつことが明らかになった。
前年度に調製したb型多糖抗原に特異的なモノクロ-ナル抗体(mAbS5)とリポ多糖に特異的なモノクロ-ナル抗体(mAbL2)をラテックス粒子に吸着させたあと、歯周病細菌の全菌体や菌体抽出物と反応させた。mAbL2を吸着したラテックス粒子は、全ての血清型のA.actinomycetemcomitansの全菌体や培養上清と特異的に凝集を生じた。mAbS5を吸着したラテックス粒子は、b型の血清型のA.actinomycetemcomitans全菌体や培養上清およびBacteroides gingivalisの全菌体と凝集を生じた。しかし、B.gingivalisとの凝集は菌体を加熱(100℃、3分間)やトリプシン処理すると消失した。
以上の結果より、本研究で確立したラテックス凝集試験法は、A.actinomycetemcomitansの同定や血清型の判定に有用であると考えられる。
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[Publications] T.Nishihara et al.: "Inhibitory effects of rabbit antisera on mitogenic activity of Actinobacillus actinomycetemcomitans lipopolysaccharide" J.Periodont.Res.24. 165-170 (1989)
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[Publications] T.Nishihara et al.: "Membrane interleukin-l induces bone resorption in organ culture" J.Immunol.143. 1881-1886 (1989)
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[Publications] K.Amano et al.: "Immunological and structural characterization of the serotyp-specific polysaccharide antigen from Actinobacillus actinomycetemcomitans(serotype b)" Infect.Immun.57. 2942-2946 (1989)
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[Publications] N.Shibuya et al.: "6-Deoxy-D-talan and 6-deoxy-L-talan:novel serotype-specific polysaccharide antigens from Actinobacillus actinomycetemcomitans" Europ.J.Biochem.
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[Publications] T.Koga et al.: "Monoclonal antibody-coated latex agglutination assay for identification of Actinobacillus actinomycetemcomitans" Zentralbl.Bacteriol.Microbiol.Hyg.
