1988 Fiscal Year Annual Research Report
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63480490
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| Research Institution | The University of Tokyo |
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Principal Investigator |
井上 圭三 東京大学, 薬学部, 教授 (30072937)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
梅田 真郷 東京大学, 薬学部, 助手 (10185069)
工藤 一郎 東京大学, 薬学部, 助教授 (30134612)
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| Keywords | ヒト血小板 / ウサギ血小板 / ホスホリパーゼA_2 / アラキドン酸代謝 |
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| Research Abstract |
ウサギおよびヒト血小板を中心にして、ホスホリパーゼA_2に関して生化学的に解析し以下の結果を得た。
(1)ウサギ血小板の分泌性ホスホリパーゼA_2:ウサギ血小板をPAF(血小板活性化因子)等の刺激剤で処理すると、細胞外にホスホリパーゼA_2が分泌されることを見いだした。これを精製したところ、分子量約14キロダルトンであった。本酵素はラット血小板が刺激に応じて放出する酵素、ラットやウサギの実験炎症部位に見いだされる酵素、ヒト関節リウマチ患者関節腔液中に見られる酵素等とよく類似しており、いわゆる高等動物グループII型酵素であった。従来報告のあるウサギ血小板膜から高塩濃度溶液で可溶化される酵素は、本酵素と同一であった。
(2)ウサギ血小板の細胞質ホスホリパーゼA_2:ウサギ血小板を緩和な条件下(N_2キャビテーション法)で破壊し遠心することにより、顆粒崩壊によるコンタミを最小限に抑え、血小板の細胞質を調製した。この画分を酵素源として、アラキドン酸含有リン脂質を基質に加水分解したところ、刺激時に細胞外に分泌される先述の酵素と異なった性質のホスホリパーゼA_2を検出した。本酵素を、イオン交換、疎水カラム、ゲルろ過等により精製したところ、分子量約110キロダルトンであった。
(3)ヒト血小板の細胞質ホスホリパーゼA_2:ヒト血小板ホモジネートの10万g上清中に、ウサギ血小板細胞質中の酵素と同様の活性を見いだした。本酵素の精製をほぼ終了した。
(4)ヒト骨髄性白血病細胞株中のホスホリパーゼA_2:株化白血病細胞(7株)中のホスホリパーゼA_2活性を調べ、そのうち数種でヒト血小板細胞質酵素と類似の活性を見いだした。
以上のように、従来報告のない新しいタイプの細胞内ホスホリパーゼA_2の酵素学的解析をほぼ完了した。
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[Publications] 早川磨紀男: J.Biochemistry. 103. 263-266 (1988)
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[Publications] 東佐由美: J.Biochemistry. 103. 442-447 (1988)
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[Publications] 原俊太郎: J.Biochemistry. 104. 326-328 (1988)
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[Publications] 金大敬: J.Biochemistry. 104. 492-494 (1988)
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[Publications] 早川磨紀男: J.Biochemistry. 104. 767-772 (1988)
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[Publications] 村上誠: J.Biochemistry. 104. 884-888 (1988)
