1989 Fiscal Year Annual Research Report
アニオンチャンネルのCa^<2+>による制御機構の解明
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63480511
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| Research Institution | Osaka University |
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Principal Investigator |
大川 和秋 大阪大学, 教養部, 助手 (30029714)
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| Keywords | シャジクモ原形質膜 / クロライド(Cl^-)チャンネル / プロトン(H^+)ポンプ / パッチクランプ法 / クロライドチャンネルの速度的解析 / 局所麻酔剤 / カルシウム(Ca^<2+>)とクロライドチャンネル / カルシウムと局所麻酔剤 |
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| Research Abstract |
I.パッチクランプ法によるCl^-チャンネルの研究。通常のシャジクモ節間細胞の原形質膜を、高張液により原形質膜分離を誘導し、細胞壁に切り口を開くことによりパッチクランプ法をこの細胞に適用することが可能になった。1)シャジクモ節間細胞のCl^-チャンネルの単位コンダクタンスの大きさから分類すると少なくとも2種類存在する(100mM Cl^-溶液中において15〜20pSおよび数pS)。単位コンダクタンスの大きさはCl^-濃度に依存するが、その依存の仕様について検討中である。2)細胞内+側と一側の両方向において電圧依存性をもってこのチャンネルは開くが同じCl^-チャンネルか異なるチャンネルかも現在検討中である。3)いわゆるアニオンチャンネルの阻害剤が有効に効かないことにより、実験の組立が極めて困難である。4)Ca^<2+>ーbufferによりCa^<2+>濃度依存性を調べると、10^<-7>Mで開き、10^<-5.5>Mで閉じる。このことは生理条件とは異なっており、生理条件下における調節因子を考慮しつつ現在研究を進めている。
II.上記の研究と平行して1)通常の細胞の過分極側において開くCl^-チャンネルの2価イオン依存性のシリ-ズを決定した。2)またその電圧依存性と時間依存性とのkineticsを明確にした。3)局所麻酔剤をリピッド層より細胞内にいれることにより、H^+ーpumpおよびCl^-チャンネルの性質を整理している。局所麻酔剤はシャジクモ節間細胞の膜の脱分極を引き起こすが、これはいわゆる受動チャンネルとH^+ーpumpのいずれにも影響を与えているからである。
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[Publications] Ohkawa Taka-aki: "Electrical tolerance(breakdown)of the Chara corallina plsamalemma.I.Necessity of Ca^<2+>." Journal of Membrane Biology. 103. 273-282 (1988)
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[Publications] Ohkawa Taka-aki: "Electrical tolerance(breakdown)of the Chara corallina plasmalemma.II.Inductive property of membrane and effects of pH and impermeable monovalent cations on on breakdown phenomenon." Journal of Membrane Biology. (1990)
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[Publications] Nosaka Shu-ichi: "Effects of local anesthetics on the Chara plsamalemma.I.Change in resting potential.Part I." Journal of Membrane Biology.
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[Publications] Ohkawa Taka-aki: "Effects of local anesthetics on the Chara plsamlemma.I.Change in resting potential.Part II." Journal of Membrane Biology.
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[Publications] Tsutsui Izuo: "Plant Membrane Transport/eds.J.Dainty et al." Elsevier INC.,Netherland, 712 (1989)
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[Publications] Ohkawa Taka-aki: "ION PUMPS:Structure Function Regulation/ed.W.D.Stein" ALAN R.LISS,INC.New York, (1988)
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[Publications] Ohkawa Taka-aki: "Plant Membrane Transport/eds.J.Dainty et al." Elsevier INC.,Netherland, 712 (1989)
