1989 Fiscal Year Annual Research Report
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63540573
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| Research Institution | Osaka University |
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Principal Investigator |
原 黎子 大阪大学, 理学部, 助教授 (20075138)
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| Keywords | 視覚 / 網膜 / 視細胞 / レチナ-ル / レチノ-ル / ロドプシン / レチノクロム / レチナ-ル結合蛋白質 |
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| Research Abstract |
スルメイカ網膜に含まれているレチナ-ル結合蛋白質(RALBP)は、視細胞外節に存在するロドプシンの光産物であるメタロドプシンおよび内節に存在するレチノクロムの光産物であるメタレチノクロムとの間で互いのレチナ-ルを交換し、もとの色素を再生させることがin vitroおよびin vivo実験によって示され、さらにRALBP抗体を適用する金コロイドラベル法によってその局在を検討した結果、RALBPは視細胞内を内外節にわたって移動し、両色素と共にレチナ-ルの再利用系を形成していることが明らかとなった。本年度は、網膜の脱水素酵素系と、上記メタ色素・RALBP間でのレチナ-ル交換機構の解明をめざす2つを中心に研究を進めた。
(1)網膜における脱水素酵素:血中のレチノイドは大部分が11ーシス型レチノ-ルであり、いっぽう網膜には11ーシス型レチノ-ルに特異的で、それをリガンドしたRALBPを基質とする脱水素酵素の活性が網膜の膜分画に見いだされてきた。未だ酵素の分離精製には至っていないが、組織切片を用いて活性を測定する方法によって、その分布はミエロイド小体のそれと一致することが分かり、この酵素がレチノクロム系と関連して機能し、視物資の再生・維持に係わる可能性が示唆された。
(2)メタ色素・RALBP間でのレチナ-ル交換機能:交換の物理化学的機構を解明するため、RALBPの一次構造の決定に続いて、cDNAによりレチノクロムの構造決定を行った。それは301個のアミノ酸残基を含む分子量33.490の蛋白質であった。また、ハイドロパシィプロットにより、ウシやタコの視物資と同様に7本のαーヘリックスが膜を貫いている可能性が示された。今後、ロドプシンの構造決定うを行い、スルメイカにおいて得られた3者1組のデ-タをもとに相互の機能関連を検討してゆく予定である。
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[Publications] S.ーL.Fong: "IRBPーlike proteins in the eyes of six cephalopod speciesーImmunocytochemical relationship to vertebrate interstitial retinolーbinding protein(IRBP)and cephalopod retinalーbinding protein." Vision Research. 28. 563-573 (1988)
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[Publications] Akihisa Terakita: "Retinalーbinding protein as a shuttle for retinal in the rhodopsinーretinochrome system of the squid retina." Vision Research. 29. 639-652 (1989)
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[Publications] Fumio Tokunaga: "Photoreaction of retinochrome at very low temperatures." FEBS Letter. (1990)
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[Publications] Ikuko HaraーNishimura: "Cloning and nucleotide sequence of cDNA for retinochrome,a retinal photoisomerase from the Squidretina" FEBS Letter. (1990)
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[Publications] Akihisa Terakita: "The role of retinalーbinding protein(RALBP)during dark regeneration of photopigments in the squid retina." Exptl.Eye Research. (1990)
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[Publications] Akio Kishigami: "Photopigments of the retina of Nautilus pompilius.In:Molecular Physiology of Retinal Proteins(ed.T.Hara)" Yamada Science Foundation Press,Osaka, 457373-374 (1988)
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[Publications] Kazuo Tsujimoto: "Formation and photoisomerization of retinochrome analog.In:Molecular Physiology of Retinal Proteins(ed.T.Hara)" Yamada Science Foundation Press,Osaka, 457391-392 (1988)
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[Publications] Mikio Nishimura: "cDNA cloning for retinal proteins in the squid retina.In:Molecular Physiology of Retinal Proteins(ed.T.Hara)" Yamada Science Foundation Press,Osaka, 457419-420 (1988)
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[Publications] Koichi Ozaki: "Structure of squid retinalーbinding protein.In:Molesular Physiology of Retinal Proteins(ed.T.Hara)" Yamada Science Foundation Press,Osaka, 457421-422 (1988)
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[Publications] Akihara Terakita: "The role of retinalーbinding protein in tge chromophore exchange between rhodosin and retinochrome systems.In:Molecular Physiology of Retinal Proteins(ed.T,Hara)" Yamada Science Foundation Press,Osaka, 457423-424 (1988)
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[Publications] 原黎子: "レチナ-ル結合蛋白質と網膜感光性色素 蛋白質・核酸・酵素,34" 共立出版,東京, 471-483 (1988)
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[Publications] Tomiyuki Hara: "Retinalーbinding Protein:Function in a Chromophore Exchange System in the Squid Visual Cell.In:Progress in Retinal Research,Vol.10(ed.Osborne&Chader)" Pergamon Press,OxfordーNew York, (1991)
