細胞融合および単離核の利用による細胞質雄性不稔の導入および維持系統の育成

1989 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 63560001
• Research Institution: Chiba University
• Principal Investigator: 三位 正洋 千葉大学, 園芸学部, 助教授 (30093074)
• Keywords: ニンジン / Daucus Carota / 不定胚 / 細胞質雄性不稔 / 非対称細胞融合 / サイブリッド / X線照射 / ヨ-ドアセトアミド

Research Abstract

ニンジンを材料に、X線照射とIOA(iodoacetamide)処理を応用した細胞融合法により、(1)正常稔性系統への雄性不稔細胞質の導入によ雄性不稔化個体の作出、(2)細胞質雄性不稔系統への正常稔性細胞質の導入による可稔化個体の作出、さらに(3)雄性不稔系ニンジンへのセルリ-細胞質の導入による異属間サイブリッドの作出、を目的に前年度に引き続き基礎研究を行った。
コロニ-形成阻害の結果をもとに、細胞質提供側に60KRのX線照射を、細胞質受容側に10mMIOA処理を行ってPEGによる細胞融合を行った結果、いずれの組合せにおいても、得られたコロニ-から不定胚を経て植物体が再生した。しかし、目的とした雄性不稔形質に関しての変化は、いずれの組合せにおいても見い出すことができなかった。この実験で適用した60KRのX線や10mMのIOA処理したプロトプラストをそれぞれ単独で融合した場合、若干のコロニ-形成が認められるため、本実験で得られた不定胚や植物体は、多分にこのような片親同士の融合産物に由来したものと思われた。このような問題を回避するため、片親同士の融合産物が分裂できない70KRと15mMで処理したプロトプラストを融合した結果、現在不定胚が得られている。今後これらの不定胚から植物体を再生し、細胞質置換の有無を調査する予定である。
ニンジンの培養細胞から核の単離を試みたが、胚形成能の高い細胞は単離が困難で、胚形成能を失った液胞化した細胞のみで単離核を得ることができた。分化能を持たない核を用いた場合、植物体再生に困難が予想されるため、今後は分化能の高い細胞で引続き単離条件を検討する必要がある。