殺菌因子RaRFの蛋白構造および遺伝子構造の系統発生学的比較

1990 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 63570200
• Research Institution: Kitasato University
• Principal Investigator: 川上 正也 北里大学, 医学部, 教授 (50050349)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 中村 国衛 北里大学, 医学部, 助教授 (00118829) ; 猪原 節之介 北里大学, 医学部, 助教授 (90101295) ; 高橋 明義 北里大学, 医学部, 助手 (10183849)
• Keywords: タンパク質一次構造 / cDNA / 補体 / 殺菌 / 血清タンパク質 / 腸内細菌 / 系統発生 / リポ多糖体

Research Abstract

私達は、サルモネラなどの腸内細菌の多糖体に結合し、補体を活性化して殺菌する因子が、脊椎動物の血清にあることを見出して、これをRa反応性因子(RaRF)と名づけた。最近の研究によって、RaRFは補体成分C1とレクチンの性質を兼ね備えた血清蛋白であることがわかってきた。すなわち、RaRFは、サルモネラをはじめとする各種の腸内細菌がその細胞表面に共通にもっている多糖体に特異的に結合するレクチンであるが、結合後に、補体の第一成分C1と同じ方式で、補体成分C4およびC2を活性化し、それによって補体カスケ-ドの活性化を引き起こす。本年度の研究によって次のことが明らかになった。
1.マウスのRaRFは3種類以上の蛋白質からなる複合体で、多糖体に結合する成分およびC4/C2を活性化するセリンプロテア-ゼ成分から成っている。
2.このプロテア-ゼは分子量10万のポリペプチドであるが、還元によって分子量7万と2.9万の鎖になる。後者にはDFPが結合するのでプロテア-ゼの活性基を担っていると考えられる。
3.7万おおび2.9万の鎖の一部のアミノ酸配列をしらべたところ、ヒトC1の亜成分C1r、C1sとの類似性が認められた。現在cDNAを分離して全構造を解析中である。
4.マウスRaRFのポリペプチド構成は補体成分C1と似ているが、すでに判明している結合成分の一次構造、および今回しらべたプロテア-ゼ成分の分子量とアミノ酸配列から、マウスC1とは異なるものであることがわかった。
5.ニワトリのRaRFの構成ポリペプチドの分子量もマウスのものと似ており、免疫学的交差反応もあった。

Research Products

• [Publications] 猪原 和泉: "A new complement dependent bactericidal factor found in nonimmune mouse sera:specific binding to polysaccharide of Ra chemotype Salmonella." Journal of Immunology. 128. 1256-1260 (1982)
• [Publications] 川上 正也: "Properties of a new complement dependent bactericidal factor specific for Ra chemotype Salmonella in sera of conventional and germfree mice." Journal of Immunology. 129. 2198-2201 (1982)
• [Publications] 猪原 和泉: "Physicochemical properties of a new bactericidal factor." Biochemal and Biophysical Research Communications. 107. 1185-1190 (1982)
• [Publications] 川上 正也: "A group of bactericidal factors conserved by vertebrates for more than 300 million years." Journal of Immunology. 132. 2578-2581 (1984)
• [Publications] 川上 正也: "血清の補体依存性殺菌タンパク(Camp)" 日本細菌学雑誌. 39. 1-14 (1984)
• [Publications] 川上 正也: "新しく見つかった殺菌因子群Camp." 化学と生物. 23. 278-279 (1985)
• [Publications] 猪原 和泉: "The 28k and 70k dalton polypeptide components of mouse Raーreactive factor are resposible for bactericidal activity." Biochemal and Biophysical Research Communications. 152. 636-641 (1988)
• [Publications] 季 育華: "The C4 and C2 but not C1 components of complement are responsible for the complement activation triggered by the Raーreactive factor." Journal of Immunology. 141. 4271-4275 (1988)
• [Publications] 季 育華: "Complement activating bactericidal factor,Raーreactive factor,of rats: similarity to that of mice." Kitasato Medicine. 18. 651-658 (1988)
• [Publications] 川上 正也: "RaRFー補体成分C1に似た血清レクチン." 生化学. 61. 482-486 (1988)
• [Publications] 猪原 節之介: "Major component of Raーreactive factor,a complement activating bactericidal protein,in mouse serum." Journal of Immunology. 146. (1991)