1990 Fiscal Year Annual Research Report
| Project/Area Number |
63570341
|
|---|
| Research Institution | Tohoku University |
|---|
Principal Investigator |
丹野 恭夫 東北大学, 医学部附属病院, 助手 (20133944)
|
|---|
| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
山内 広平 東北大学, 医学部附属病院, 助手 (20200579)
|
|---|
| Keywords | 肥満細胞 / 好塩基球 / ヒスタミン / ヒスチジン脱炭酸素(HDC) / cDNA / 腫瘍壊死因子(TNF) / 肺組織 / IgE |
|---|
| Research Abstract |
1.前年度までにヒト好塩基球性白血病細胞KU812Fにヒスタミン合成酵素histidine decarboxylase(HDC)が存在し,phorbol myristate acetate(PMA)により誘導されること,大量培養により部分精製を行い,分子量約11万でラットのHDCと同様であることを示した。本年度はヒトHDCのcDNAクロ-ニングを試みた。すなわち,報告されたラットHDCのcDNAをもとにoligonucleotideを合成し,それをprobeとしてKU812FのcDNAライブラリ-をスクリ-ニングしたところpTNー1とpTNー2の2つのクロ-ンがとれ,COS誘導実験によりpTNー2の方に活性が認められた。pTNー2は2.4K base painのinsertを有し,塩基配列を沢定したところ662のアミノ酸よりなり分子量74.178であった。ラットとマウスのHDCとは85%の相同性があった。PMA刺激後のKU812FのRNAを経時的に分離し今回クロ-ニングしたcDNAをprobeとしてNorthern analyeisを行ったところ、無刺激でも2種のHDCmRNAを発現しており,経時的変化はなく,活性の誘導はtranslationのレベルでおこることが示唆された。
2.前回までにラット好塩基球性白血病細胞株RBLー2H3および切除肺を抗原刺激するとtumor necrasis factor(TNF)_<ーα>の産生と遺伝子発現のあることを示した。今回はヒト切除肺を用いて同様の検討を行なった。切除肺を細切後,ヒトモノクロ-ナルIgEで受動感作し,マウス抗ヒトIgE抗体で刺激して上清中および組織中のヒスタミンとTN下活性を測定するとともにRNAを抽出しNorthern blot analysisを行なった。ヒスタミンは刺激後1時間,TNF2時間後,TNFmRNAは1時間後から検出され4時間まで上昇した。現在,TNF産生細胞を免疫組織学的,電顕的およびin situ hybridization法により検討中である。
|
-
[Publications] Y.Tanno,Y.Shindoh,T.Takishima: "Effects of interleukin 3,interleukin 4 and fibroblasts on cultures of human lung mast cells in bronchoalveolar lavage fluids" Cell Structure and Function. 15. 137-142 (1990)
-
[Publications] R.MamuneーSato,Y.Tanno,K.Maeyama,Y.Miura,T.Takishima,K.Kishi,T.Fukuda,T.Watanabe: "Histidine decarboxy alse…in human basophilic leukemia(KUー812ーF)cells:characterization and induction by phorbol myristate acetate" Biochemical Pharmacology. 40. 1125-1129 (1990)
-
[Publications] I.Ohno,Y.Tanno,K.Yamauchi,T.Takishima: "Production of tumor necrosis factor by masto cytoma P815 cells" Immunology. 69. 312-315 (1990)
-
[Publications] I.Ohno,Y.Tanno,K.Yamauchi,T.Takishima: "Gene expression and production of tumor necrosis factor by a rat basophilic leukemia cell line (RBLー2H3) with IgE receptor triggering" Immunology. 70. 88-93 (1990)
-
[Publications] K.Yamauchi,R.Sato,Y.Tanno,Y.Ohkawara,K.Maeyama,T.Watanabe,K.Satoh,M.Yoshizawa S.Shibahara,T.Takishima: "Nucleotide sequence of the cDNA encoding Lーhistidine decarboxylase derived frome human basophilic leukemia cell line,KUー812ーF" Nucleic Acids Research. 18. 5891 (1990)
-
[Publications] I.Ohno,Y.Ohkawara,K.Yamauchi,Y.Tanno,T.Takishima: "Production of tumor necrosis factor with IgE receptor triggering from sensitized lung tissue" American Journal of Respiratory Cell and Molecular Biology. 3. 285-289 (1990)
-
[Publications] 丹野 恭夫,大野 勲,(黒沢 元博・編著): "肥満細胞ー生理と病理,VIー8.抗腫瘍活性" メディカル レビュ-社, 7(669) (1990)
