1990 Fiscal Year Annual Research Report
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63570793
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| Research Institution | Yokohama City University |
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Principal Investigator |
水口 弘司 横浜市立大学, 医学部・産婦人科, 教授 (20010176)
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| Keywords | NGF / mRNA / 胎盤 / RTーPCR |
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| Research Abstract |
胎児発育における成長因子の意義を明らかにするため,胎仔における成長因子,とくにnerve growth factor(NGF)の遺伝子発現についての研究を試みたが,胎仔神経組織におけるNGFmRNAの発現量がきわめて少量であるためと考えられるが,十分な実験結果が得られなかった。そこで,その解決法の1つとして,RTーPCR(reverse transcriptaseーpolymerase chain reaction)を用いて分析することとした。胎仔組織での検討の前に,昨年度まで実験を継続しているヒト胎盤でのNGFmRNAの発現をRTーPCR法により試みた。胎児の発育は、胎児ー胎盤系という系の存在でも明らかなように,胎盤の機能と不可分の関係にある。従って,胎盤における成長因子の分析は、胎児発育の調節機構を明らかにしていく上で重要と考えられる。
RTーPCRはCellyらの方法に準拠して行い,RTによるcDNAの合成は、total RNA,PCR buffer,dNTPs,rebonuclease inhibitor,random primer,RTの反応液中で行い,この反応生成物をPCR buffer,DNA polymerase,センスおよびアンチセンスprimer ととも denaturation,Annealing,extension にて30cycle施行した。このPCR反応生成物を低分子核酸分析用agarose gel 中で電気泳動した。このようにして,ヒト胎盤から抽出したRNAからRTによって合成されたcDNAに対してPCRを30cycle行なった結果,約500baseを認め,プライマ-のデザインから予測される結果と一致し,ヒト胎盤組織中にNGFmRNAが存在することが証明された。
この胎盤における分子生物学的用手を胎児(仔)組織でさらに応用していくことが今後の課題として残った。
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Research Products
(8 results)
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[Publications] 松井 浩志: "ヒト胎盤における神経成長因子の遺伝子発現" 横浜医学. 42. 27-33 (1991)
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[Publications] 多賀 理吉,高橋 恒男,大塚 尚之,小清水 勉,鈴木 猛,茂田 博行,佐治 正彦,水口 弘司: "Embryogenesisと細胞成長因子" 産婦人科の実際. 39. 1157-1176 (1990)
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[Publications] Saji M,Taga M,and Minaguchi H.: "Epidermal Growth Factor Stimulates Cell Proliferation and Inhibits Prolactin Seeretion of the Human Decidual Cells in Culture" Endocrinol.Jap. 37. 177-182 (1990)
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[Publications] Taga M,Shigeta H,Suzuki T,Koshimizu T,Ohtsuka T,Katoh A,Minaguchi H: "Growth Factors in Fetal Growth and Differentiation" Yokohama Med.Bull.39. 173-188 (1989)
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[Publications] 鈴木 猛,茂田 博行,中山 昌樹,小清水 勉,高橋 恒男,多賀 理吉,水口 弘司: "Reckling hausen 病合併妊娠において児の髄膜瘤を出生前に診断し得た一例" 日本産婦人科学会神奈川地方部会会誌. 26. 29-33 (1989)
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[Publications] 多賀 理吉,池田 万里郎,榊原 秀也,水口 弘司: "ラット視床下部および卵巣におけるGonadotropinーreleasing hormone(GnRH)の遺伝子発現" ホルモンと臨床. 39. 101-107 (1991)
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[Publications] 水口 弘司,多賀 理吉,鈴木 猛,池田 万里郎,榊原 秀也,松井 浩志: "Reckling hausen 病と Nerve Growth Factor" 厚生省特定疾患神経皮膚症候群調査研究班平成元年度研究報告書P.76ー79, 140 (1990)
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[Publications] 水口 弘司,多賀 理吉,小清水 勉,鈴木 猛,松井 浩志,池田 万里郎,榊原 秀也: "ヒト胎盤におけるNerve Growth Factor(NGF)の遺伝子発現" 厚生省特定疾患神経皮膚症候群調査研究班昭和63年度研究報告書P.88ー91, 135 (1989)
