血小板由来の新しい増殖因子HGFの遺伝子クローニングと構造解析

1988 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 63580155
• Research Institution: Kyushu University
• Principal Investigator: 中村 敏一 九州大学, 理学部, 教授 (00049397)
• Keywords: 肝細胞増殖因子 / HGF cDNA / 一次構造 / 初代培養肝細胞 / 肝再生

Research Abstract

HGFのN末端27残基を基にIong probe及びshortprobeのオリゴヌクレオチドを合成した。これらのプローブを使ってmegakaryocytesのcDNAIibraryからHGFcDNAを、他方、ラットgenomic IibraryからHGFgeneをcloningすることを試みた。いずれのIibraryからもpositiveらしきクローンが数個得られ、そのインサートの塩基配列を決定したが、いずれもpseudo cloneであった。
他方、HGF活性がCCI_4誘発させた肝炎ラットの血清ならびに肝炎組織中に検出され、その活性レベルが肝炎の重症度とよく平行することを明らかにした。そこで、CCI_4誘導ラット肝炎組織からpoly(A)RNAを調製し、これからλgt10にIibraryを作製した。上記オリゴヌクレオチドプローブを使い、肝炎組織IibraryからHGF cDNAのscreeningを行ったところ、Iong及びshort probeともにpositiveなクローンが2個得られた。この強くpositiveになるクローンのインサートのDNA塩素配列を決定したところ、HGF cDNAの一部であることが明らかになった。現在、このHGF cDNAを用いfull size cDNAのクローニングとともにヒトgenomic libraryからヒトHGF geneのクローニングを行っている。

Research Products

• [Publications] T.Nakamura.: J.Biolchem.103. 700-706 (1988)
• [Publications] S.Takai.: J.Biochem.103. 848-852 (1988)
• [Publications] H.Tsuda.: Carcinogenesis. 9. 547-554 (1988)
• [Publications] C.Noda.: J.Biol Chem.263. 14764-14768 (1988)
• [Publications] C.Noda.: FEBS Lett.234. 331-335 (1988)
• [Publications] T.Nakamura,: Exp.Cell Res.179. 488-497 (1988)
• [Publications] T.Nakamura.: Gunma Symposia Endocrinology. 25. 179-193 (1988)
• [Publications] F.Okada,: FEBS Lett.242. 240-244 (1989)
• [Publications] K.Shiota.: Biomed.Res.(1989)
• [Publications] S.Takai.: Gastroenterology. (1989)
• [Publications] A.Hino.: J.Biochem.(1989)
• [Publications] S.Kanda.: Cancer Res.(1989)
• [Publications] M.Takashina.: Exp.Cell Res.(1989)
• [Publications] C.Inoue.: J.Biol.Chem. (1989)
• [Publications] F.Okada.: J.Biochem.(1989)
• [Publications] 中村敏一: 日本臨床. 46. 964-974 (1988)
• [Publications] 中村敏一: サイエンス. 1. 46-56 (1988)
• [Publications] 中村敏一: 肝胆膵. 16. 373-381 (1988)
• [Publications] 中村敏一: 実験医学. 6. 453-455 (1988)
• [Publications] 中村敏一: ホルモンと臨床. 36. 83-90 (1988)
• [Publications] 前園克己: 日本農芸化学会誌. 62. 1675-1678 (1988)
• [Publications] 小平輝朋: 実験医学. 6. 1105-1113 (1988)
• [Publications] 原野友之: 生物物理. 28. 18-22 (1988)
• [Publications] 中村敏一: 実験医学. 6. 60-62 (1988)
• [Publications] 中村敏一: 蛋白質・核酸・酵素・臨時増刊. 臨時増刊. (1989)
• [Publications] 中村敏一: 癌と化学療法. (1989)
• [Publications] 橋村悦朗: 組織培養. (1989)
• [Publications] 中村敏一: 日本骨代謝学会雑誌. (1989)
• [Publications] 中村敏一: "新生化学実験法6巻生物活性を用いる測定法第9章4節 HGF(肝細胞増殖因子)" 丸善出版, 234-241 (1988)
• [Publications] 中村敏一: "肝臓 (臨床生理学シリーズ第5巻)第6章1節 肝再生因子" 南江堂, (1988)
• [Publications] 中村敏一: "無血清培養法第2編第5章 肝細胞の無血清培養" 講談社サイエンティフィク, (1989)
• [Publications] 中村敏一: "肝臓フォーラム肝再生調節因子" 医事出版社, (1989)