哺乳類における輸卵管分子の卵に与える役割

1988 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 63640501
• Research Institution: Hokkaido University
• Principal Investigator: 内貴 正治 北海道大学, 獣医学部, 助教授 (10020752)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 高橋 芳幸 北海道大学, 獣医学部, 助教授 (70167485) ; 笠井 憲幸 北海道大学, 医学部, 助教授 (60001947) ; 廣井 正彦 山形大学, 医学部, 教授 (60018364)
• Keywords: 輸卵管糖タンパク質 / ハムスター / 単クローン抗体 / 血液型A型糖鎖 / A型糖脂質 / 透明帯 / 精子の認識

Research Abstract

両生類において卵が輸卵管を通過する際、輸卵管のムチン様糖タンパク質を付着し、精子の認識を助けることがよく知られている。このようなことは哺乳類でも起こっており、ハムスターで明らかとなった。この輸卵管由来糖タンパク質のどのような構造を精子が認識してるかを知る目的でハムスター輸卵管糖タンパク質に対する単クローン抗体を作成した。マウスに免疫して作成した1つの単クローン抗体(AZPO-8)はIgGlで、輸卵管通過卵とのみ反応し、卵巣卵と反応しない抗体を得た。この抗体は卵管膨大部及び峡部の粘膜上皮細胞と強く反応し、子宮内膜と頚部内膜表面にも反応する物質が認められた。輸卵管糖タンパク質、輸卵管通過卵透明体糖タンパク質で共に反応するタンパク質は200Kの分子量を示すものが主成分で、その他に43〜95Kにかけて多数のバンドが認められた。ZPO-8抗体はA型ヒト赤血球を特異的に認識し、これを1600倍希釈まで凝集した。この凝集は赤血球をパパイン消化することにより10倍力価が上昇したので赤血球より糖脂質成分を精製した。その結果以下の糖脂質が抗原として同定された。いずれも血液型A型抗原活性をもつものと同一であった。
1)GalNAc(α2-3)Gal(β1-4)GlcNAc(β1-3)Gal(β1-4)Glc-Ceramide(α1-2)
Fuc
2)GalNAc(α2-3)Gal(β1-4)GlcNAc(β1-3)Gal(β1-4)GlcNAc(β1-3)-(α1-2) Gal(β1-4)Glc-Ceramide
Fuc
しかし現在までの検討の結果ハムスター精子がこの糖鎖構造を認識して卵に付着する知見は得られていない。現在精子の認識する化学構造に対する単クローン抗体を作成検討中である。

Research Products

• [Publications] Araki, Y.: J. Reproductive Immunology. 11. 193-208 (1987)
• [Publications] Usuba, O.: Jpn. J. Cancer Res.(Gann). 79. 1340-1348 (1988)
• [Publications] Hishinuma, M.: Jpn. J. Vet. Sci.
• [Publications] Yamasita, T.: Lab. Animal Science.
• [Publications] 高橋芳幸: "受精卵(胚)移植に関連した繁殖障害「牛病学(代2版)」" 近代出版, 524-531 (1988)
• [Publications] 内貴正治: "細胞認識のマーカー:血液型物質「バイオサイエンス研究における新しい素材とマーカー・プローブ」" 共立出版,