Srcファミリ-遺伝子産物に対する特異的阻害剤の検索とその抗癌活性の評価

1989 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 63870106
• Research Institution: The University of Tokyo
• Principal Investigator: 伊庭 英夫 東京大学, 医化学研究所, 助教授 (60111449)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 中野 洋文 協和醗酵, 東京研究所, 主任研究員
• Keywords: タンパク質リン酸化酵素 / カルフォスチン / 特異的阻害剤 / スタウロスポリン / 抗癌活性 / srcファミリ-

Research Abstract

1.Staurosporine類縁化合物について、これまで計42種類をp60^<src>、及びp120^<gag-fas>のキナ-ゼ特異的阻害を示標に検索を進めたが、有意にチロシンキナ-ゼに対して特異的阻害を示すものは見いだされていない。ただしこのうちUCN-01はCキナ-ゼに対するIC_<50>が約10nMと低く、Aキナ-ゼや、チロシンキナ-ゼに対するIC_<50>が100nMであることを考えると、Cキナ-ゼに対する特異性は高いといえる。
2.前年度に、Cキナ-ゼに対する特異性の高い阻害剤として見い出されたUCN1028について、その特異性を決定している機構について研究を進めた。この抗癌活性を評価する前の必須なステップであるのみでなく、チロシンキナ-ゼ特異的阻害剤の設計に有用であると考えたためである。UCN1028を構成する主要成分を、分画精製し、これまで5化合物を得ている。これらはCalphostinA,B,C,D,Iとそれぞれ名付けられ、Cキナ-ゼに対する阻害活性と、種々の腫瘍細胞に対するcytotoxicityを評価した
3.2の検索と評価で、最もよい阻害効果を示したCalphostinCについて、その阻害機構を調べた所、Calpain消化を受けたCキナ-ゼに対して、阻害活性を示さないことから、Cキナ-ゼの制御ドメインと結合して機能すると結論された。またCalphostinCが、Cキナ-ゼとpDBuとの結合を阻害することも判明した。

Research Products

• [Publications] T.I pida: "Calphostins,novel and specific inhititors of protein Kinase C II.Chemical Structures" J.Antibiotics. 42. 1475-1481 (1989)
• [Publications] I.Takahashi: "UCN-01 and UCN-02,new selective inhibitors of protein Kinase C" J.Antibiotics. 42. 571-576 (1989)
• [Publications] E.Kobayashi: "CALPHOSTINC(UCN-1028C),a nobel microbial compound,is a lrighly potent and specific inhibilor of protein Kinase C" B.B.R.C.159. 548-553 (1989)