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2016 Fiscal Year Annual Research Report

光で人工的細胞内情報伝達系を制御するシステムの構築

Publicly Offered Research

Project AreaDevelopment of Molecular Robots equipped with sensors and intelligence
Project/Area Number 15H00812
Research InstitutionKyoto University

Principal Investigator

山下 高廣  京都大学, 理学研究科, 助教 (50378535)

Project Period (FY) 2015-04-01 – 2017-03-31
Keywords光受容蛋白質 / シグナル伝達
Outline of Annual Research Achievements

光は、その直進性・高速性・非侵襲性から生体反応の人為的な制御に使用される。そのため、生体における光受容システムの改変は、人工的な分子システムを制御する「入力系」に利用できる可能性がある。動物のロドプシン類は光刺激でGタンパク質などを活性化するため、それを改変することで種々の細胞内シグナリングを制御できることが期待される。そこで本研究では、光や熱に安定な全トランス型レチナールを結合できる動物型ロドプシン類などのレチナールタンパク質を改変して、人工的な分子システムを制御する分子ツールを提供することを目的とする。本年度は以下の解析を行った。
1.Opn5L1は、動物型ロドプシン類の中で初めてフォトサイクルによって活性が制御されることが明らかとなり、繰り返しの光刺激に対応できる可能性がある。そこで、Opn5L1に変異を導入するなどにより、フォトサイクルの時定数を変化させた。その結果、秒オーダーの時定数のものから時間オーダーの時定数のものまで作製することに成功した。
2.全トランス型レチナールを結合するOpn5について、吸収波長特性を変化させた。そのために、種々のレチナールのアナログを取り込ませたところ、大きく長波長にシフトさせることに成功した。また、このレチナールアナログを取り込んだOpn5が通常のレチナールを取り込んだ場合と同様の光反応を行うことも確認できた。
3.フォトサイクルにより活性が制御されるOpn5L1分子を用いて、培養細胞内の分子システムを光で制御できるか検討した。その結果、光依存的にcAMP量の変化を誘起することが可能であることがわかった。

Research Progress Status

28年度が最終年度であるため、記入しない。

Strategy for Future Research Activity

28年度が最終年度であるため、記入しない。

  • Research Products

    (9 results)

All 2017 2016

All Journal Article (6 results) (of which Int'l Joint Research: 1 results,  Peer Reviewed: 6 results,  Open Access: 3 results,  Acknowledgement Compliant: 3 results) Presentation (3 results) (of which Int'l Joint Research: 1 results,  Invited: 1 results)

  • [Journal Article] Spontaneous activation of visual pigments in relation to openness/closedness of chromophore-binding pocket.2017

    • Author(s)
      W.W. Yue
    • Journal Title

      Elife

      Volume: 6 Pages: e18492.

    • DOI

      10.7554/eLife.18492

    • Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
  • [Journal Article] Alternative Formation of Red-Shifted Channelrhodopsins: Noncovalent Incorporation with Retinal-Based Enamine-Type Schiff Bases and Mutated Channelopsin.2017

    • Author(s)
      T. Okitsu
    • Journal Title

      Chem. Pharm. Bull.

      Volume: 65 Pages: 356-358

    • DOI

      10.1248/cpb.c17-00054

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Adaptation of cone pigments found in green rods for scotopic vision through a single amino acid mutation2017

    • Author(s)
      K. Kojima
    • Journal Title

      Proc. Natl. Acad. Sci. USA

      Volume: in press Pages: in press

    • DOI

      in press

    • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
  • [Journal Article] Evolutionary Steps Involving Counterion Displacement in a Tunicate Opsin2017

    • Author(s)
      K. Kojima
    • Journal Title

      Proc. Natl. Acad. Sci. USA

      Volume: in press Pages: in press

    • DOI

      in press

    • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
  • [Journal Article] Two UV-Sensitive Photoreceptor Proteins, Opn5m and Opn5m2 in Ray-Finned Fish with Distinct Molecular Properties and Broad Distribution in the Retina and Brain.2016

    • Author(s)
      K. Sato
    • Journal Title

      PLoS One

      Volume: 11 Pages: e0155339

    • DOI

      10.1371/journal.pone.0155339

    • Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
  • [Journal Article] Two Opsin 3-Related Proteins in the Chicken Retina and Brain: A TMT-Type Opsin 3 Is a Blue-Light Sensor in Retinal Horizontal Cells, Hypothalamus, and Cerebellum.2016

    • Author(s)
      M. Kato
    • Journal Title

      PLoS One

      Volume: 11 Pages: e0163925

    • DOI

      10.1371/journal.pone.0163925

    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Presentation] Diversity of the photoreceptor protein Opn5 found in deuterostomes2016

    • Author(s)
      T. Yamashita
    • Organizer
      日本生物物理学会第54回年会
    • Place of Presentation
      つくば国際会議場
    • Year and Date
      2016-11-25
  • [Presentation] Analysis of the photoreceptor protein Opn5 found in deuterostomes other than vertebrates2016

    • Author(s)
      T. Yamashita
    • Organizer
      日本動物学会第87回大会
    • Place of Presentation
      沖縄コンベンションセンター
    • Year and Date
      2016-11-17 – 2016-11-18
  • [Presentation] Characterization of visible light-sensitive subtype of non-visual opsin, Opn52016

    • Author(s)
      T. Yamashita
    • Organizer
      17th International Conference on Retinal Proteins
    • Place of Presentation
      ポツダム(ドイツ)
    • Year and Date
      2016-10-05
    • Int'l Joint Research / Invited

URL: 

Published: 2018-01-16  

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