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2020 Fiscal Year Annual Research Report

Redesign of biosynthetic machinery for plant-derived sesquiterpene lactones

Publicly Offered Research

Project AreaCreation of Complex Functional Molecules by Rational Redesign of Biosynthetic Machineries
Project/Area Number 19H04657
Research InstitutionOsaka University

Principal Investigator

関 光  大阪大学, 工学研究科, 准教授 (30392004)

Project Period (FY) 2019-04-01 – 2021-03-31
Keywords植物セスキテルペノイド / 生合成 / セスキテルペン環化酵素 / シトクロムP450 / 組換え酵母 / ニコチアナベンサミアナ
Outline of Annual Research Achievements

本研究では、植物が生産するセスキテルペノイドラクトンの生合成に関与する酵素群を明らかにし、コンビナトリアル生合成手法によるセスキテルペノイドラクトンの生合成リデザインを行う。なかでも、抗ガン活性を有するGuaianolide Sesquiterpene Lactones(GSL)や、抗マラリア薬原料であるアルテミシニンを生産するクソニンジン(Artemisia annua)以外は詳細な解析がなされていないヨモギ属植物に着目した植物セスキテルペノイドの生合成系の解明と異種ホストにおける再構築を目的とする。2019年度は、組換え酵母における生合成経路の再構築を中心に行ったが、2020年度は、植物におけるタンパク質大量発現系として開発されたジェミニウイルス複製システムを利用したベクター系を利用したベンサミアナタバコ葉における生合成酵素の一過的発現によるセスキテルペノイドラクトン生合成経路の再構築に取り組んだ。アルテミシニン前駆物質であるアモルファジエンの合成酵素(ADS)およびGSLの前駆物質であるグアイエン合成酵素遺伝子を従来型のバイナリーベクターで一過的に発現させた場合には酵素反応生成物が検出されなかったのに対して、ジェミニウイルスベクターを用いて一過的に発現させた場合には酵素反応生成物が検出されたことから、本ベクター系がベンサミアナタバコやレタス等の異種植物ホストにおける一過的な生合成酵素群の高発現によるセスキテルペノイドラクトン生合成経路の再構築とリデザインに有効であることが示された。今後、各酵素遺伝子の発現コンストラクトを保持するアグロバクテリウムの感染液を混合して接種することで生合成のリデザインを進める。

Research Progress Status

令和2年度が最終年度であるため、記入しない。

Strategy for Future Research Activity

令和2年度が最終年度であるため、記入しない。

  • Research Products

    (8 results)

All 2021 2020 Other

All Int'l Joint Research (1 results) Journal Article (3 results) (of which Int'l Joint Research: 2 results,  Peer Reviewed: 3 results,  Open Access: 1 results) Presentation (4 results)

  • [Int'l Joint Research] Universidad Regional Amazonica IKIAM(エクアドル)

    • Country Name
      ECUADOR
    • Counterpart Institution
      Universidad Regional Amazonica IKIAM
  • [Journal Article] Allylic Hydroxylation Activity Is a Source of Saponin Chemodiversity in the Genus Glycyrrhiza2021

    • Author(s)
      Fanani Much Z、Sawai Satoru、Seki Hikaru、Ishimori Masato、Ohyama Kiyoshi、Fukushima Ery O、Sudo Hiroshi、Saito Kazuki、Muranaka Toshiya
    • Journal Title

      Plant and Cell Physiology

      Volume: in press Pages: in press

    • DOI

      10.1093/pcp/pcaa173

    • Peer Reviewed / Int'l Joint Research
  • [Journal Article] A cellulose synthase-derived enzyme catalyses 3-O-glucuronosylation in saponin biosynthesis2020

    • Author(s)
      Chung Soo Yeon、Seki Hikaru、Fujisawa Yukiko、Shimoda Yoshikazu、Hiraga Susumu、Nomura Yuhta、Saito Kazuki、Ishimoto Masao、Muranaka Toshiya
    • Journal Title

      Nature Communications

      Volume: 11 Pages: 5664

    • DOI

      10.1038/s41467-020-19399-0

    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Production of the bioactive plant‐derived triterpenoid morolic acid in engineered Saccharomyces cerevisiae2020

    • Author(s)
      Srisawat Pisanee、Yasumoto Shuhei、Fukushima Ery O.、Robertlee Jekson、Seki Hikaru、Muranaka Toshiya
    • Journal Title

      Biotechnology and Bioengineering

      Volume: 117 Pages: 2198~2208

    • DOI

      10.1002/bit.27357

    • Peer Reviewed / Int'l Joint Research
  • [Presentation] Comparative analysis of plant NADPH-cytochrome P450 reductase of legumes towards triterpenoids biosynthesis2021

    • Author(s)
      Istiandari P, Yasumoto S, Fukushima EO, Seki H, Muranaka T
    • Organizer
      第62回日本植物生理学会年会
  • [Presentation] Identification of key amino acid residues for catalytic activity and substrate specificity of CYP716A subfamily in site-specific oxidation of triterpenoid2021

    • Author(s)
      Romsuk J, Yasumoto S, Seki H, Fukushima EO, Muranaka T
    • Organizer
      第62回日本植物生理学会年会
  • [Presentation] トリテルペノイドサポニン生合成におけるセルロースシンターゼライクの機能解析2020

    • Author(s)
      チョンスヨン、關 光、藤澤由紀子、下田宜司、平賀勧、野村勇太、斉藤和季、石本政男、村中俊哉
    • Organizer
      第30回イソプレノイド研究会
  • [Presentation] ミヤコグサのベツリン酸生合成を制御するbHLH型転写因子の同定2020

    • Author(s)
      鈴木隼人、髙橋宏和、福島エリオデット、關 光、中園幹生、村中俊哉
    • Organizer
      第30回イソプレノイド研究会

URL: 

Published: 2021-12-27  

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