2020 Fiscal Year Annual Research Report
光標識技術による細胞間相互作用の1細胞トランスクリプトーム解析
Publicly Offered Research
| Project Area | Creation, function and structure of neo-self |
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| Project/Area Number |
19H04814
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| Research Institution | Jichi Medical University |
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Principal Investigator |
口丸 高弘 自治医科大学, 医学部, 講師 (10570591)
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| Project Period (FY) |
2019-04-01 – 2021-03-31
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| Keywords | 近接細胞蛍光標識 / 1細胞トランスクリプトーム / 腫瘍免疫 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究課題では、独自に開発した近接細胞の蛍光標識技術と1細胞トランスクリプトームを使って、腫瘍の悪性化、特に腫瘍免疫応答の回避に関わるがん細胞-間質細胞相互作用を明らかにすることを目指した。そのために、遺伝子コード型の近接細胞蛍光標識技術であるHUNTER(Highlighting Unknown Neighbors Through Extracellular gfp-Reconstituion)を開発し、がん細胞と空間的に近接し相互作用する組織間室細胞を蛍光標識する技術を開発・最適化した。HUNTERは、分割型の緑色蛍光タンパク質(GFP)に基づいた技術であり、それぞれのGFPの分割断片をがん細胞と間質細胞に遺伝子コードすることで機能する。HUNTERは、血球系細胞を含むほぼ全てのタイプの間質細胞に対して有効であることをin vitro共培養系での評価から確認しており、がん細胞と相互作用した間質細胞の特異的な蛍光標識に基づく高精度な細胞分取が可能であった。さらに、マウスの肝臓におけるがん細胞と間質細胞の相互作用をモデルとするために、アデノ随伴ウィルスを使ってHUNTERレポーターをマウスの肝間質細胞に遺伝子導入した。その結果、肝組織に形成された微小腫瘍コロニーの周辺の間質細胞が蛍光標識されていることが明らかになり、HUNTERが生体組織においても機能することを確認した。蛍光標識された間質細胞の肝臓からの単離と1細胞オミクス解析の実施条件検討もほぼ完了しており、肝臓における腫瘍免疫の回避機構における新たな生物学的知見の導出を目指し研究を進めている。
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| Research Progress Status |
令和2年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Strategy for Future Research Activity |
令和2年度が最終年度であるため、記入しない。
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Research Products
(1 results)
