2020 Fiscal Year Annual Research Report
Proofreading of protein trafficking by Msp1 at the inter-organelle contact sites
Publicly Offered Research
| Project Area | Toward an integrative understanding of functional zones in organelles |
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| Project/Area Number |
20H04912
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| Research Institution | Kyoto Sangyo University |
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Principal Investigator |
遠藤 斗志也 京都産業大学, 生命科学部, 教授 (70152014)
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| Project Period (FY) |
2020-04-01 – 2021-03-31
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| Keywords | ミトコンドリア / ER / Msp1 / AAA-ATPアーゼ / 配送の校正 / テイルアンカー型膜タンパク質 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
われわれは，ミトコンドリア外膜のAAA-ATPアーゼのMsp1が外膜に誤配送されたテイルアンカー型膜タンパク質（TAタンパク質）の配送の校正を行うことを見出した。そこで，校正の対象となる誤配送されたタンパク質や，配送のやり直しにどのくらい一般性があるのかを明らかにし，校正に伴うタンパク質のオルガネラ間移動がオルガネラ間コンタクト部位を介して起こるかどうかを明らかにすることをめざした。様々な機能が提案されているオルガネラ間コンタクトの機能に，タンパク質の移動という新たな働きが付け加わることで，本領域の主題であるオルガネラゾーンに注目したオルガネラバイオロジーが大きく広がることが期待される。
今年度は，Msp1によってミトコンドリア外膜から引き抜かれた誤配送TAタンパク質が，ミトコンドリア外膜から ER膜に移動する機構の詳細に解析するために，蛍光顕微鏡を用いたタイムラプス観察実験系をセットアップした。ペルオキシソームからミトコンドリアに誤配送されるモデル基質としてPex15Δ30にGFPを融合させたGFP-Pex15Δ30を用いた。このタンパク質を薬剤誘導的に一時的に発現させ，その分解をDoa10欠損により抑制した。次に，Msp1の発現をガラクトース誘導型プロモータ等でオンにしたときの基質の移動を，蛍光顕微鏡（DeltaVision）でモニターした。このタイムラプス観察実験系で，Msp1によるPex15Δ30のミトコンドリアからERへの移行をリアルタイムで追跡できることが明らかになった。
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| Research Progress Status |
令和2年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Strategy for Future Research Activity |
令和2年度が最終年度であるため、記入しない。
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