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2009 Fiscal Year Annual Research Report

DNAヘリカーゼ活性を含有するユビキチンリガーゼE3

Publicly Offered Research

Project AreaProteolysis in the Regulation of Biological Processes
Project/Area Number 21025034
Research InstitutionNational Institute of Genetics

Principal Investigator

山尾 文明  National Institute of Genetics, 分子遺伝研究系, 教授 (10158074)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 筒井 康博  東京工業大学, 大学院・生命理工学研究科, 助教 (00390625)
Keywords遺伝学 / 遺伝子 / 核酸 / タンパク質
Research Abstract

F-タンパク質の一つであるFbh1はSCFユビキチンリガーゼE3の構成要素としてのF-Boxモチーフと同時に、DNAヘリケースドメインとその酵素活性を有することに新奇な特徴があり、その基質認識の機構は従来のSCFリガーゼとは異なり、基質が何であるかとともに非常に興味深い.分裂酵母fbh1の変異の表現型からはDNA損傷に対する組換え修復に関わると思われた.そこで以下の点を確認した.
● 実際に上の二つの酵素活性があるかどうかを検証したところ試験管内での両者の活性を確認した.
● 最近開発されたin vitro相同組換え反応系においてその機能を解析したところ複数のステップで正あるいは負に相同組み換えを制御した.
● Fbh1を含むSCFリガーゼのユビキチン化基質はDNA相同組換えを制御するタンパク質ではないかと仮定し、分裂酵母でいくつかの候補タンパク質を精製し、直接in vitroのユビキチン化で検索したところ、Rhp51(Rad51ホモログ)がモノユビキチン化され、その補助因子であるRhp52(RAD22ホモログ)がポリユビキチン化された.後者が主なる標的タンパク質と思われるが、両者の結合に依存してRhp51も修飾されることが判明した.
● 引き続きこれらのユビキチン化サイトの決定と細胞内での修飾の検定、分解あるいは分解以外のユビキチン化機能の検索を行っている.

  • Research Products

    (3 results)

All 2010 2009 Other

All Presentation (2 results) Remarks (1 results)

  • [Presentation] Analysis of F-box DNA helicase Fbh1 involved in regulation o homologous recombination in fission yeast2010

    • Author(s)
      Y.Tsutsui et al.
    • Organizer
      International Conference on Radiation and Cancer Biology
    • Place of Presentation
      Nagasaki
    • Year and Date
      20100100
  • [Presentation] Biochemical characterization of fission yeast FBH1, a DNA helicase with F-box involved in homologous recombination2009

    • Author(s)
      Y.Tsutsui et al.
    • Organizer
      The 5th International Fission Yeast Meeting
    • Place of Presentation
      Tokyo
    • Year and Date
      20090500
  • [Remarks]

    • URL

      http://www.nig.ac.jp/section/yamao/yamao-j.html

URL: 

Published: 2011-06-16   Modified: 2016-04-21  

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