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2009 Fiscal Year Annual Research Report

Piwi-piRNA複合体による生殖幹細胞維持とクロマチン制御の分子接点

Publicly Offered Research

Project AreaThe germline: its developmental cycle and epigenome network
Project/Area Number 21028019
Research InstitutionKeio University

Principal Investigator

齋藤 都暁  Keio University, 医学部, 講師 (30423396)

KeywordsPiwi / クロマチン / piRNA / ショウジョウバエ / 培養細胞 / HP1 / RNAi / レトロトランスポゾン
Research Abstract

Piwiは核に局在し、エピジェネティックな制御を介してショウジョウバエの生殖幹細胞の維持に機能すると推測されている。平成21年度に、ショウジョウバエ卵巣の体細胞由来培養細胞(OSC)においてRNAi法を確立し、クロモドメイン蛋白質の一つであるHPlaのノックダウンを行った。その結果、コントロールに比較してレトロトランスポゾンの発現が数百倍上昇することを見いだした。これはPiwiのノックダウン実験においても認められた現象であることから、HPlaとPiwiは共にレトロトランスポゾンの発現抑制に関与することが示唆された。しかし、HPlaに対する抗体を用いて免疫沈降実験を行った結果、Piwiとの相互作用は認められなかった。従って、PiwiはHPla以外の因子、例えばヒストン修飾因子などと相互作用し、機能する可能性が考えられた。これまで、PiwiはHPlaと直接結合し機能するというモデルが提示されているが、本研究は、HPla以外の因子が関与する可能性を示唆している。そこでPiwi特異的モノクローナル抗体を用いて免疫沈降実験を行い、相互作用蛋白質の単離・同定を試みた。その結果、質量分析によりOSCにおいていくつかのPiwi相互作用因子を同定した。相互作用因子の一つであるCG7878は、マウス精巣で特異的に発現するDEAD-box型ヘリケースのショウジョウバエオルトログであり、Piwiの機能発現への関与が期待される。

  • Research Products

    (4 results)

All 2010 2009

All Journal Article (1 results) (of which Peer Reviewed: 1 results) Presentation (3 results)

  • [Journal Article] A regulatory circuit for piwi by the large Maf gene traffic jam in Drosophila.2009

    • Author(s)
      Kuniaki Saito
    • Journal Title

      Nature 461

      Pages: 1296-1299

    • Peer Reviewed
  • [Presentation] New components of the primary processing pathway for Piwi-interacting piRNAs in Drosophila2010

    • Author(s)
      Kuniaki Saito
    • Organizer
      Keystone symposia
    • Place of Presentation
      Keystone Resort (USA)
    • Year and Date
      2010-01-17
  • [Presentation] 新規mRNA由来piRNAの同定と大Maf因子traffic jamによるショウジョウバエPiwiの機能制御2009

    • Author(s)
      齋藤都暁
    • Organizer
      日本RNA学会
    • Place of Presentation
      朱鷺メッセ(新潟県)
    • Year and Date
      2009-07-28
  • [Presentation] piRNAの世代間伝搬が担う遺伝シグナル2009

    • Author(s)
      齋藤都暁
    • Organizer
      日本エピジェネティクス研究会
    • Place of Presentation
      学術総合センター(東京都)
    • Year and Date
      2009-05-22

URL: 

Published: 2011-06-16   Modified: 2016-04-21  

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