2010 Fiscal Year Annual Research Report
マウス雄生殖幹細胞におけるGDNFニッチシグナルの同定と幹細胞維持の解析
Publicly Offered Research
| Project Area | Regulatory Mechanism of Gamete Stem Cells |
|---|
| Project/Area Number |
21116508
|
|---|
| Research Institution | Keio University |
|---|
Principal Investigator |
永松 剛 慶應義塾大学, 医学部, 助教 (70453545)
|
|---|
| Keywords | 生殖細胞 / ニッチ |
|---|
| Research Abstract |
雄生殖幹細胞は生体外での長期培養系が確立していることから、完全とはいえないまでもニッチをin vitroで再構築できている組織幹細胞系列であるといえる。これまでにマウス、ショウジョウバエ、ゼブラフィッシュで生体外培養系が確立されている中で、マウスにおいてのみ必須の条件がGDNFという単一の因子に絞り込まれており、雄生殖幹細胞維持のニッチシグナルと捉えることができる。研究代表者は生体外培養系の存在と、ニッチシグナルがGDNFとして同定されている、という特徴に着目し、ニッチシグナルGDNFの下流で働く作用因子の同定を試みた。
piggy Bacトランスポゼースおよび認識配列であるTIR(Terminal Inverted Repeat)配列でプロモーター領域(CAGGS)を挟みこんだプラスミドベクター(TIR-SA-CAGGS-SD-TIR-SA-neo)を作成した。GDNF非存在下ではGS細胞は増殖できないので、このランダムミュータジェネシスの結果、増殖してくる細胞はいずれかの遺伝子の発現が強制的に誘導されたためだと考えることができる。これらの増殖してきた細胞から候補遺伝子の単離を試みた。しかしながら、現在までのところGS細胞のコロニーは得られていない、遺伝子道入.に関してはInvitrogenのNeonを使うことで他の強制発現系のGS細胞安定株が得られているので問題ないと考えられた。可能性として、使用したSDがGS細胞で働いていないことが考えられ、SD配列が異なるものを複数用意して再度GDNF非依存性に増殖するコロニーの単離を行う。
|
-
[Journal Article] A germ cell specific gene, Prmt5 works as somatic cell repmgramming2011
Author(s)
Nagamatsu G, Kosaka T, Kawasumi M, Kinoshita T, Takubo K, Akiyama H, Sudo T, Kobayashi T, Oya M, Suda T.
-
Journal Title
J Biol Chem.
Volume: 286(12)
Pages: 10641-8
Peer Reviewed
-
-
