2022 Fiscal Year Annual Research Report
非典型翻訳の試験管内再構成とそのメカニズムの解明
Publicly Offered Research
| Project Area | Multifaceted Proteins: Expanding and Transformative Protein World |
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21H05727
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| Research Institution | University of Hyogo |
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Principal Investigator |
町田 幸大 兵庫県立大学, 工学研究科, 准教授 (20553093)
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| Project Period (FY) |
2021-09-10 – 2023-03-31
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| Keywords | CAGリピート / 非典型翻訳 / ポリアミン / 再構成型無細胞翻訳系 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究の目的は、ハンチントン病に関与するCAGリピート配列の異常伸長に起因する非典型的な翻訳を、ヒト因子由来の再構成型無細胞翻訳系で再現することにより非典型翻訳の分子機構の一端を明らかにすることである。そのための研究計画として、本年度も申請者が開発したヒト因子由来の再構成型無細胞翻訳系を利用して翻訳開始因子群が非典型翻訳に与える影響を解明するための実験に取り組んだ。具体的には、CAGリピートを有するHtt exon-1遺伝子のmRNAを作成し、これをヒト因子由来再構成型無細胞翻訳系で翻訳させると、細胞内で生じる翻訳（標準翻訳：AUG開始コドンから始まるin-frameと、翻訳開始点が不明の非標準翻訳：+1 frame産物および+2 frame産物）が再構成系でも再現できること、また非標準翻訳にも翻訳開始因子群に依存した翻訳開始フェーズが必要であることを明らかにした。さらに、非標準翻訳の原因となる因子を探索する中で、RNAに相互作用することで核酸やタンパク質合成を促進すると言われるポリアミンが、CAGリピート由来の+1 frameと+2 frameの翻訳を顕著に促進することを新たに発見した。一方、非標準翻訳の開始点を決めるために質量分析による解析を行ったが、得られた結果はHtt exon-1とは無関係の配列であったため、分析に供する産物の量（合成量）が少ないことや精製度が低いことが問題点の一つとして挙げられた。
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| Research Progress Status |
令和4年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Strategy for Future Research Activity |
令和4年度が最終年度であるため、記入しない。
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