哺乳類卵子における精子核認証機構の解明

2010 Fiscal Year Annual Research Report

• Project Area: Elucidation of Common Mechanisms for Allogeneic Authentication in Animals and Plants
• Project/Area Number: 22112517
• Research Institution: Hamamatsu University School of Medicine
• Principal Investigator: 伊藤 昌彦 浜松医科大学, 医学部, 助教 (50385423)
• Keywords: 発生・分化 / 動物 / アロ認証機構 / 精子核 / シグナル伝達

Research Abstract

受精は、配偶子同士の接近・膜の結合および融合・精子核の崩壊など一連の複雑な過程から成り立っている。生物種を超えて、それぞれの過程には配偶子同士を認識するための巧妙な仕組みが数多く備わっており、動植物において近年様々な分子が同定され、その機能が解析されている。しかしながら、精子核崩壊後のプロタミンの解離の過程や、精子核の脱凝縮制御因子など哺乳類においてほとんど解析は進んでいない。そこで本研究では、特に精子-卵膜融合後の認証機構、すなわち卵子細胞質による精子核および精子染色体を認識および制御機構を明らかにする目的で研究を行う。
1)精子染色体認識タンパク質の同定
精子染色体に含まれるプロタミンを特異的に認識するタンパク質を同定するために、ストレプトアビジン結合ペプチド(SBP)とカルモジュリン結合ペプチド(CBP)と融合したプロタミン(Prm1,Prm2)発現アデノウイルスベクターを作製した、またコントロールとしてHAおよびMycタグ融合Prm1,Prm2発現ベクターを作製し、ウエスタン解析を行った。
2)発現および細胞内局在の解析
マウス以外の動物種で精子染色体認識に関わるタンパクについて発現解析を行い、NASP, SET, NAP1L1がマウス卵に発現していることを明らかにした。
3)受精直後の細胞内局在の変化
精子と卵細胞膜の融合後のPrm1,Prm2の局在変化を免疫染色法により調べ、精子融合後の時空間的な制御機構を明らかにした。

Research Products

• [Journal Article] Peripheral B cells may serve as a reservoir for persistent hepatitis C virus infection (2010)
  • Author(s): Ito, M., Masumi, A., Mochida, K., Kukihara, H., Moriishi, K., Matsuura, Y., Yamaguchi, K., Mizuochi, T.
  • Journal Title: J Innate Immunity Volume: 2 Pages: 607-617
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Enhanced expression of lymphomagenesis-related genes in peripheral blood B cells of chronic hepatitis C patients (2010)
  • Author(s): Ito, M., Murakami, K., Suzuki, T., Mochida, K., Suzuki, M., Ikebuchi, K., Yamaguchi, K., Mizuochi, T.
  • Journal Title: Clinical Immunology Volume: 135 Pages: 459-465
  • Peer Reviewed
• [Presentation] Arrest of spermatogenesis at round spermatids in PLCZ1-deficient mice. (2011)
  • Author(s): Masahiko Ito.
  • Organizer: The 11th International Symposium on Spermatology
  • Place of Presentation: Okinawa Convention Center
  • Year and Date: 2011-06-26