2011 Fiscal Year Annual Research Report
TRIMファミリーによる基質蛋白修飾を介した癌と感染症での発症制御システムの解明
Publicly Offered Research
| Project Area | Regulation of signal transduction by post-translational modifications and its pathogenic dysregulation |
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| Project/Area Number |
23117508
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| Research Institution | The University of Tokyo |
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Principal Investigator |
浦野 友彦 東京大学, 医学部附属病院, 特任講師 (20334386)
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| Keywords | 癌 / シグナル伝達 / トランスレーショナルリサーチ |
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| Research Abstract |
研究代表者らは、Efp(別名:TRIM25)がユビキチン化蛋白修飾活性を有する酵素であり、そのシステムの破綻が乳癌やウイルス感染症の発症に関与することを見出した。EfpはTRIMファミリー蛋白群に分類され、Efp以外のTRIM蛋白もユビキチン化ならびに類似蛋白修飾であるISG15化活性を有することが報告されている。研究代表者らは、TRIM蛋白による基質蛋白に対する蛋白修飾がNF-κBシグナルをはじめとした様々なシグナル伝達を制御し、その破綻が癌やウイルス感染症の病態生理において重要な役割を果たしている可能性を見出した。そこで、本研究では、TRIM蛋白とそれに対する基質蛋白、結合蛋白との蛋白相互作用を探索し、病態における役割を検討する。平成23年度においてはTRIM蛋白の一つであるTRIM17と結合する蛋白としてZWINTを同定した。TRIM17はZWINTと結合すると同時にZWINTの蛋白分解を誘導し、それにより細胞増殖を負に制御することを見出した(J Biochem 151,139-144,2012)。現在、ZWINT以外のTRIM17結合蛋白を複数同定しており、これら結合蛋白との相互作用を介したTRIM17による病態での役割を細胞モデルならびにTRIM17ノックアウトを用いて探索している。TRIM17以外のTR-Mファミリーノックアウトマウスも作製し、飼育中である。また、リコンビナント蛋白ならびに合成ペプチドを用いてTRIM蛋白に対する抗体を複数作製した。平成23年度の研究実績を生かして、今後はモデル動物の表現型の解析と臨床サンプルでの免疫染色を行い、NF-κBシグナルを中心とした、TRIM蛋白シグナル伝達経路を同定し、本シグナルを制御することで癌や感染症の診断や治療への臨床応用を目指していく。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
TRIM蛋白のひとりであるTRIM17の結合蛋白の同定と機能検索を行い、論文報告を行った。TRIM17ならびにそれ以外のTRIM蛋白の結合蛋白を複数同定している。さらにTRIM17,TRIM47,Efp(TRIM25)ノックアウトマウスの作成が終了し、その表現型を探索しており、おおむね順調に計画が進行している。
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| Strategy for Future Research Activity |
平成23年度において作成したTRIMファミリー蛋白に対する抗体を用い、今後は癌組織での免疫染色を行い、悪性度とTRIM蛋白の発現との関連解析を行う。発現に差違が見出されたTRIMファミリーに関しては、癌細胞株を用いて目的とするTRIMファミリーをsiRNAにてノッグダウンし、その時に細胞周期、NF-κBシグナル、アポトーシスなどの細胞機能に与える影響に関して検討を行う。特に癌細胞におけるTRIM蛋白/NF-κBシグナルカスケードに関し、詳細な検討を行う。さらに、TRIM蛋白を過剰発現ならびにノックダウンした際の、癌細胞の機能変化をin vitro、in vivoで検討し、癌の発症や進展に関与するTRIM蛋白の同定を行う。今回重要性が明らかとなった、ヒト疾患関連TRIMファミリー蛋白複合体の精製による基質同定と応用も行う。さらに研究代表者らが作成した、Efp、TRIM17、TRIM47ノックアウトマウスを用い、これらTRIMファミリー蛋白の生理機能の解析を加えて行う。以上の研究によりTRIM蛋白の機能検:索をNF-κBシグナルを中心に解析し、その病理的、生理的意義を明らかにしていく。
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