2011 Fiscal Year Annual Research Report

造血幹細胞におけるMafBの機能解析

Publicly Offered Research

Project Area	Molecular mechanisms of cell fate determination in the cells that undergo stepwise differentiation to multiple pathways
Project/Area Number	23118504
Research Institution	University of Tsukuba
Principal Investigator	高橋智筑波大学, 医学医療系, 教授 (50271896)
Keywords	造血幹細胞 / 転写因子 / MafB / マクロファージ / M1/M2
Research Abstract	今年度は、既に作製されているMafB領域GFPノックインマウスを用いて、以下の研究を実施した。 1.MafB領域GFPノックインマウスのGFP発現造血幹細胞のin vitroにおける機能解析 MafB領域GFPノックインマウスにおいてGFPを発現している造血幹細胞が、単球・マクロファージ細胞系列への選択的な分化能を有しているかを解析した。その結果、GFPを発現している細胞はM-CSFに反応して、単球・マクロファージ細胞系列へより分化することが明らかとなった 2.MafB領域GFPノックインマウスのGFP発現造血幹細胞のin vivoにおける機能解析 MafB領域GFPノックインマウスにおけるGFP陽性造血幹細胞群が、生体内で単球・マクロファージ系列への選択的分化能力を有しているかを、骨髄移植により明らかにする実験を行った。当初少数の細胞による骨髄移植が成功しなかったが、条件を検討した結果、移植細胞の生着が確認できる様になった。 3.MafB領域GFPノックインマウスのGFP発現造血幹細胞の遺伝子発現状態の機能解析 GFP陽性細胞群とGFP陰性細胞群での遺伝子発現様式を比較することにより、細胞運命決定に関わる内部因子の状態を解析した。その結果、MafBの発現は、GFP陽性細胞で高いこと、いくつかの幹細胞マーカーが発現していることが明らかとなった。 4.MafB領域GFPノックインマウスのGFP発現造血幹細胞の細胞表面抗原の解析 GFP発現造血幹細胞上に存在していると分子を解析した。いくつかの幹細胞マーカーが発現していることが明らかとなった。
Current Status of Research Progress	Current Status of Research Progress 2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned. Reason 当初目的とした実験は実施でき、ある程度の新知見を得ることができた。骨髄移植系の確立では当初問題賀あったが現在は、ほぼ解決できている。
Strategy for Future Research Activity	上述した様に、当初骨髄移植系において移植した細胞の生着が確認できないことがあったが、移植系を改善することにより、結果が得られる様になった。来年度は改善した実験系を用いて解析を進める予定である。