2011 Fiscal Year Annual Research Report
EVI1は造血及び神経幹細胞の運命を制御する
Publicly Offered Research
| Project Area | Molecular mechanisms of cell fate determination in the cells that undergo stepwise differentiation to multiple pathways |
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| Project/Area Number |
23118523
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| Research Institution | University of Miyazaki |
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Principal Investigator |
森下 和広 宮崎大学, 医学部, 教授 (80260321)
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| Keywords | 造血 / 神経 / 分化 / EVI1 |
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| Research Abstract |
(1)造血幹細胞維持・骨髄細胞分化に関わるEVI1の機能解析
EVI1により制御される遺伝子群をCHIP sequenceと遺伝子発現により数十遺伝子絞り込んだ。その中の代表例として、ITGA6、プロモーター解析を行った。ITGA6にはGATA2並びにEVI1が、GPR56にはEVI1の直接関与による転写制御を同定した。またAng1について、EVI1高発現白血病細胞での高発現は細胞増殖への阻害ならびにGO期細胞の維持に関連しており、Ang1発現阻害によるGO期細胞集団の低下、並びに細胞増殖能の亢進を認めた。さらにGPR56発現抑制白血病細胞の作成により、増殖能の低下、アポトーシスの亢進、細胞接着能の低下を来たした。GPR56欠損マウスは骨髄幹細胞数の低下と、髄外造血亢進を来たし、骨髄ニッチへの接着性低下を引き起こしていた。
(2)神経幹細胞維持・神経細胞分化に関わる機能解析
a)マウスES細胞(MEB5)を用いた細胞系で、Neurosphereからの神経分化系において、EVI1遺伝子はグリア細胞への分化を抑制し、神経細胞への分化に促進的に関与し、神経軸索伸張に関わることが示唆された。b)3例の神経膠芽腫患者由来gliomainitiating cellsを単離培養樹立した。この細胞系でもEyI1は発現しており、shEVI1導入によりSox2、Musashil、Nestin発現が低下し、幹細胞性の消失,グリア細胞マーカーの低下が見られた。同じくEVIl遺伝子発現抑制によりNotch signal系の発現の低下が見られ、Notch情報伝達系を制御していることが示唆された。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
(1)造血幹細胞維持・骨髄細胞分化に関わるEVI1の機能解析においては、標的遺伝子群を明らかにし、調節機構がわかってきた。またGPR56欠損マウスの解析が順調に進み、幹細胞維持との関連性が明らかになった。(2)神経幹細胞維持・神経細胞分化に関わる機能解析においてEVI1が神経幹細胞維持に必須で有り、またNotch情報伝達系に関わることがわかり、また神経細胞分化、神経軸索伸張に重要である事がわかった。
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| Strategy for Future Research Activity |
問題点としては、造血においても神経においてもconditional KOマウスの掛け合わせがうまくいかず、成体脳におけるEVI1欠損の影響がまだ実験できていない点である。時間の関係上、すでにあるEVI1欠損マウスで胎児期脳を用いたアッセイ系を構築中である。glioma initiating cellsを用いてさらに分子生物学的検討を行っていく。EVI1ファミリーである、MEL1欠損マウスの神経幹細胞異常についても検討を進めているし、また同時に、ショウジョウバエにおけるEVI1ホモログ欠損を引き起こし、神経細胞分化や、軸索伸張の検討も構築中である。
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Research Products
(15 results)
